卡托普利對性2型糖尿病心肌病大鼠模型心臟保護(hù)作用研究

1、卡托普利對實(shí)驗(yàn)性卡托普利對實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病心肌病大鼠模型心臟保護(hù)作用研究型糖尿病心肌病大鼠模型心臟保護(hù)作用研究董世芬1，洪纓1，靳洪濤2，孫建寧1?（1.北京中醫(yī)藥大學(xué)中藥學(xué)院，北京100102；2.中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院藥物研究所新藥安全評價研究中心，北京100050）【摘要摘要】目的目的研究卡托普利對實(shí)驗(yàn)性2型糖尿病心肌?。═2DC）模型動物心臟保護(hù)作用和可能機(jī)制。方法方法以高糖脂飼料負(fù)荷30mgkg劑量鏈脲佐菌素一次性腹腔注

2、射建立T2DC大鼠模型，觀察卡托普利45mgkg灌胃給藥6周對模型動物血糖和血脂水平，心臟功能和結(jié)構(gòu)變化，心肌脂肪酸含量以及心肌組織過氧化物增殖體激活受體α（PPARα）和葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)體4（GLUT4）基因表達(dá)等指標(biāo)的影響。結(jié)果結(jié)果與T2DC大鼠模型比較，卡托普利給藥后，左心室收縮壓、左心室最大收縮速率、左心室最大舒張速率的絕對值和心輸出量分別顯著增加15%、77%、52%和54%（P0.05或P0.01）；室間隔厚度降低40%（P0.0

3、01）；血漿糖化血紅蛋白和心肌組織游離脂肪酸含量分別降低31%和24%（P0.01，P0.05）；心肌組織PPARα基因表達(dá)顯著降低（P0.05），GLUT4基因表達(dá)顯著增加（P0.05）。結(jié)論結(jié)論卡托普利可以顯著改善T2DC模型動物心臟功能、抑制心室重構(gòu)，其作用機(jī)理可能同調(diào)節(jié)與能量代謝相關(guān)基因表達(dá)、減輕心臟內(nèi)脂肪積聚有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞關(guān)鍵詞】2型糖尿病心肌病；卡托普利；心臟功能；心臟結(jié)構(gòu)；能量代謝【中圖分類號中圖分類號】R332Prote

4、ctiveeffectsofcaptopriloncardiacfunctionstructureinexperimentaltype2diabeticcardiomyopathyratmodelDONGShifen1HONGYing1JINHongtao2SUNJianning1(1.SchoolofChineseMateriaMedicaBeijingUniversityofChineseMedicine，Beijing100102

5、China2.DepartmentofEvaluationofDrugSafetyInstituteofMateriaMedicaChineseAcademyofMedicalSciences&PekingUnionMedicalCollegeBeijing100050China)【Abstract】ObjectiveTostudyeffectsofcaptopriloncardiacfunctionstructureintheexpe

6、rimentaltype2diabeticcardiomyopathy(T2DC)ratmodel.MethodsTheexperimentaltype2DCmodelratswereinducedbyfeedingwithhighsucrosefatdietintraperitoneal(i.p.)injectionwith30mgkgofstreptozotocin.Themodelratswereintragastricgiven

7、withcaptoprilatthedoseof45mgkgfsixmonthstotally.Atthethirteenthweektheparametersofcardiacoutput(CO)leftventricularsystolicpressure(LVSP)leftventricularenddiastolicpressure(LVEDP)themaximumrateofmyocardialcontraction(dpdt

8、max)themaximumrateofmyocardialdiastole(dpdtmax)weredetectedusingMP150polygraphphysiologicalsignalrecdertoevaluatecardiacfunction.Thethicknessofinterventricularseptal(IST)left[基金項(xiàng)目]國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目（編號：30840103），北京中醫(yī)藥大學(xué)青年教師專項(xiàng)計(jì)

9、劃（編號：2012QNJSZX006），中藥防治重大疾病的藥理學(xué)研究，北京市中藥基礎(chǔ)與新藥研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。[作者簡介]董世芬（1983），女，博士，講師，研究方向：中藥防治心腦血管疾病研究，tedong4444@。[通訊作者]孫建寧（1952），女，教授，博士生導(dǎo)師，研究方向：中藥防治重大疾病創(chuàng)新藥物研究，jn_sun@。京科澳協(xié)力飼料有限公司【SCXK（京）20050007】；鏈脲佐菌素（streptozotocin，STZ）和卡托普

10、利（captopril，Cap）由Sigma公司提供，批號分別為38K152和77K1623。葡萄糖、糖化血紅蛋白（glycatedhemoglobinA1c，HbA1c）、總膽固醇（totalcholesterol，TC）、甘油三酯（triglyceride，TG）、游離脂肪酸（nonesterifiedfattyacids，NEFA）和肌酸激酶（creatinekinase，CK）生化測定試劑盒由南京建成生物工程研究所提供，批號20

11、090601。主要realtimePCR試劑：TRIzol試劑，無RNA酶的水，無RNA酶的糖原，10000Sybergreen，Invitrogenlifetechnologies提供，美國；RNA酶抑制劑，MMLV反轉(zhuǎn)錄酶，10RT緩沖液（250mMTrisHCl，pH8.3，200mMKCl，40mMMgCl2，5mMDTT），Epicentrebiotechnologies提供，美國；2.5mMdNTP混合液（dATP，dGTP

12、，dCTP和dTTP各2.5mM），HyTestLtd.提供，美國；Taq聚合酶，Promega提供；Rom9，上海生工生物工程有限公司提供；100bpDNALadder，天根生化科技（北京）有限公司提供。過氧化物增殖體激活受體α（peroxisomeproliferatactivatedreceptαPPARα）引物信息為5ATTTGCCAAGGCTATCCCA3（正向），5CAGCATCCCGTCTTTGTTCA3（反向），葡萄糖轉(zhuǎn)

13、運(yùn)體4（glucosetranspter4，GLUT4）引物信息為5TCCTTTCCTCGCAGCACTT3（正向）和5CCACAGCCTAGCCACAACAC3（反向），甘油三磷酸脫氫酶（glyceraldehydephosphatedehydrogenase，GAPDH）引物信息為5GGAAAGCTGTGGCGTGAT3（正向）和5AAGGTGGAAGAATGGGAGTT3（反向）。1.3主要實(shí)驗(yàn)儀器主要實(shí)驗(yàn)儀器紫外分光光度計(jì)：AG

14、ILENT8453，AgilentTechologies，德國；BiopacSystemMP150，BiopacSystemInc.，美國；GeneAmpPCRSystem9700，AppliedBiosystems，美國；TaKaRaPCRThermalCycler，大連寶生物工程有限公司；DYY8型穩(wěn)壓穩(wěn)流電泳儀，上海琪特分析儀器有限公司提供；H61微型電泳槽，上海精益有機(jī)玻璃制品儀器廠提供；RotGene3000RealtimeP

15、CR儀，CbettResearch提供，澳大利亞；引物設(shè)計(jì)軟件：Primer5.0，Rotgene6.0，CbettResearch提供，澳大利亞。1.4實(shí)驗(yàn)方法實(shí)驗(yàn)方法1.4.1實(shí)驗(yàn)動物分組與處理實(shí)驗(yàn)動物分組與處理Wistar大鼠45只，按體重隨機(jī)取15只作為正常對照組（control），常規(guī)飼養(yǎng)；另外30只大鼠喂飼高糖脂飼料，每2周監(jiān)測血脂水平，確認(rèn)血脂明顯升高后（約6周），按照30mgkg劑量一次性腹腔注射（i.p.）STZ（以檸

16、檬酸檸檬酸鈉緩沖液稀釋，pH4.5，4℃配制，隨配隨用），control大鼠i.p.同體積檸檬酸檸檬酸鈉緩沖液。72h后，測定血糖，以禁食12h血糖≥7.8mmolL為是糖尿病模型成功標(biāo)準(zhǔn)，24只動物血糖合格，按血糖水平隨機(jī)分為2型糖尿病心肌病模型組（T2DC）、卡托普利45mgkg治療組（T2DCCap），每組12只。藥物以0.5%羧甲基纖維素鈉（CMCNa）混懸，灌胃給藥開始于注射STZ72h后，給藥容量為1ml100g體重，每日一