注射用緩釋微球及產(chǎn)業(yè)化

1、,孫考祥綠葉制藥集團有限公司,,目錄,注射用緩釋微球及制備技術(shù) 綠葉制藥公司長效緩釋微球技術(shù)平臺LY03003項目產(chǎn)業(yè)化,,,,注射用長效緩釋微球,,4,國外已上市的注射用長效緩釋產(chǎn)品,在研的注射用緩釋微球,艾塞那肽緩釋微球，1個月給藥一次，治療二型糖尿病， ALKEMES公司。伊哌立酮緩釋微球 ，1個月給藥一次，治療精神病，諾華公司。阿立哌唑緩釋微球，1個月給藥一次，治療精神病，ALKEMES、大冢制藥。 ………,,,

2、,,Macro- Micro- Nano-Anstron>mm >um >nm,口服緩控釋制劑植入體凝膠制劑透皮制劑…,微球微針透皮脂質(zhì)體自凝膠…,學(xué)術(shù)界 1950-1980 1970-2000 1980- 1990-工業(yè)界 1960- 1980- 1990- 尚無,,

3、納米脂質(zhì)體膠束…,,溫敏膠束高分子藥物…,新DDS從實驗室到產(chǎn)業(yè)化,,,,1.生物類產(chǎn)品多肽和蛋白質(zhì)2.專利藥壽命周期管理3.慢性疾病; 精神障礙; 退化性疾病 4.靶向性和局部治療,長效緩釋微球的對象,,長效緩釋儲庫類給藥系統(tǒng),,,劑量與給藥途徑間的關(guān)系,鼻腔給藥1200 µg/d (x 56 days) 67.2 mg 注射 500 µg/d (x 56 days)

4、28.0 mg 微粒 3600 µg (2 injections) 7.2 mg,LH-RH 激動劑:抑制睪酮8周,長效緩釋給藥系統(tǒng)的優(yōu)勢,,,,各種微球形態(tài),注射用緩釋微球,活性物質(zhì),技術(shù),聚合物,影響劑型性能的因素,緩釋技術(shù)工藝背景資料,,微包封技術(shù),,常規(guī)噴霧干燥工藝,高分子-二氯甲烷溶液藥物在高分子溶液中懸浮 噴霧干燥無菌操作,,,噴霧干燥設(shè)備,實驗室設(shè)備中試設(shè)備,噴霧干燥法制備的

5、長效溴隱亭（ Parlodel ）微球,噴霧干燥法-聚合物種類對微球形態(tài)的影響,噴霧干燥法-聚合物濃度對粒徑與形態(tài)的影響,噴霧干燥法-進口溫度對微球形態(tài)的影響,噴霧干燥法-出口溫度,,,噴霧干燥法-粘度與分子量對顆粒形態(tài)的影響,噴霧干燥法-乳酸與乙醇酸之比對顆粒形狀的影響,23,D. Mohr, May 99,,,,噴霧-低溫固化法,ExtractionSolvent,Nozzle,to Freeze Dryer,Pump,liqu

6、idNitrogen,FrozenMicroparticles,atomizedDroplets,ProteinSuspension,Example: Nutropin,噴霧-低溫固化法,噴霧-低溫固化法-生長激素微球,,,,乳化溶劑蒸發(fā)法,舉例: Lupron Risperdal CONSTA,O/W or W/O/Wor S/O/W,,,,乳化溶劑蒸發(fā)法-Lupron,相分離法,,,,,,舉例Sandosta

7、tin Lar Exnatide,相分離法-Bydureon,微球的釋藥機理,上市微球(1984-2005),Decapapetyl - Depot 曲普瑞林微球; PLGA 50:50FERRING,Enantone Depot亮丙瑞林微球； PLGA 75:25TAKEDA/ABBOTTRisperdal CONSTA 藥物儲庫式系統(tǒng)中首例非典型抗精神病藥物,Enantone Luprolide,亮丙

8、瑞林醋酸; 九肽; 釋放激素激動劑PLGA 75:25; Mw 15000WOW 雙乳化過程 （無菌條件下） 適應(yīng)癥：前列腺癌，子宮內(nèi)膜異位癥,垂體受體促性腺激素釋放激素的“下調(diào)”,TAKEDA/ABBOTT,亮丙瑞林體內(nèi)外(大鼠)釋放曲線,In Vitro Release (residual),In Vivo Release (residual),Plasmalevels,Serum-testosterone after m

9、ultiple injections,患者,Risperdal CONSTA,長效緩控釋給藥傳遞系統(tǒng)中首例非典型抗精神病藥物劑量： 每兩周肌注25-50 mg = 75-150 mg 治療并預(yù)防精神分裂癥,JANSEN-CILAG,優(yōu)點: 良好地改善癥狀. 靈敏度更高良好的耐受性，減少錐體外系反應(yīng)(-肌肉運動癥狀。)復(fù)發(fā)率低,技術(shù),PLGA 75:25 75,0利培酮

10、 50,0苯甲醇 275,0醋酸乙酯 900,0水 8910,0聚乙烯醇 90,0,W/O 乳化技術(shù): 藥物在高分子溶解的油相里. “靜態(tài)混合器”。微球是凝聚產(chǎn)生的乳化液滴.凝聚是由溶劑揮發(fā)和油相稀釋產(chǎn)生的。,,,Risperdal CONSTA,Risperdal

11、CONSTA,釋放特征,長效奧曲肽,奧曲肽 =生長激素抑制素 相似物;循環(huán)八肽 適應(yīng)癥：肢端肥大癥（生長激素生產(chǎn)過剩）;生長激素依賴性腫瘤,高分子：PLGA-葡萄糖技術(shù): 相分離 (硅油); 無菌條件,NOVARTIS,釋放特征,In vitro release profile,In vivo plasmalevels volunteers,Efficacy patients,Sandostatin LAR Plasmasle

12、vels in Patients,,目錄,注射用緩釋微球及制備技術(shù) 綠葉制藥公司長效緩釋微球技術(shù)平臺LY03003項目產(chǎn)業(yè)化,成立于1994年6月18日，國家創(chuàng)新型企業(yè)專注于天然藥物、創(chuàng)新制劑和生物技術(shù)藥物的研究、開發(fā)、生產(chǎn)和銷售2000年開始建設(shè)微球制劑研究平臺，進行長效微球技術(shù)研究.2010年科技部批準公司建設(shè)“長效和靶 向制劑國家重點實驗室”2011年實現(xiàn)銷售收入42.5億元.每年投入總收入的10％用于研究開發(fā)

13、,綠葉制藥公司概況,,治療領(lǐng)域,天然藥物及中藥的研發(fā) 從天然植物以及傳統(tǒng)中藥為資源，開發(fā)成具有自主知識產(chǎn)權(quán)的新藥長效緩釋微球技術(shù) 藥物以溶解或分散的形式包含于生物可降解聚合物基質(zhì)微粒中，經(jīng)皮下或肌肉注射，藥物可在2周，4周，8周或更長時間緩慢釋放，達到長效、穩(wěn)定的藥物釋放，充分提高療效，降低副作用脂質(zhì)體技術(shù) 靶向給藥系統(tǒng)：選擇性靶向作用，提高用藥量及藥效，減少藥物毒副作用，延長藥物在血液中的半衰期生物技術(shù)（單克隆

14、抗體）及生物技術(shù)藥給藥系統(tǒng) 以新型轉(zhuǎn)基因技術(shù)及抗體生產(chǎn)中試技術(shù)為基礎(chǔ)，開發(fā)新型全人源單克隆抗體及Biosimilars,研發(fā)技術(shù)平臺,長效緩釋微球技術(shù)平臺,微球連續(xù)動態(tài)制備技術(shù)高載藥量低突釋微球制備技術(shù)微球產(chǎn)業(yè)化制備技術(shù)及設(shè)備全程無菌控制技術(shù)及設(shè)備長效緩釋制劑體內(nèi)外釋放相關(guān)性評價,微球關(guān)鍵技術(shù),,目錄,注射用緩釋微球及制備技術(shù) 綠葉制藥公司長效緩釋微球技術(shù)平臺LY03003項目產(chǎn)業(yè)化,LY03003 -首個治療帕金森病

15、的長效制劑,帕金森病(PD)患者應(yīng)用多巴或多巴胺受體激動劑后會出現(xiàn)藥效波動現(xiàn)象，如“劑末現(xiàn)象” 和“開關(guān)現(xiàn)象”。 對腦內(nèi)多巴胺受體維持長期一定程度的刺激狀態(tài)，可改善帕金森癥狀。,但是由于制劑的限制，目前國際上還沒有成熟的方法將持續(xù)多巴胺能刺激實際應(yīng)用于治療PD,LY03003 -首個治療帕金森病的長效制劑,,非麥角類多巴胺受體激動劑，通過激動D3/D2/D1而產(chǎn)生抗帕金森作用。在體內(nèi)存在首過效應(yīng)，口服生物利用度很差（大鼠口服生物利

16、用度僅為0.5%）。透皮貼劑（Neupro®）分別在2006年和2007年獲得歐洲EMEA和美國FDA批準上市，用于治療帕金森病。,,臨床應(yīng)用過程發(fā)現(xiàn)由于透皮吸收存在個體差異，使不同患者的血藥濃度波動范圍過寬換片時有一個四小時的時滯，藥效下降由于貼劑出現(xiàn)結(jié)晶，降低可供釋放的藥物量而改變療效 ，目前在美國已撤市。歐洲為了解決結(jié)晶問題，該藥需采用冷鏈貯存和配送（溫度2～8℃），而且每次處方不超過1個月。部分人群可能出現(xiàn)皮膚

17、過敏現(xiàn)象，引起紅腫，瘙癢，以及接觸性皮炎等，降低了患者的依從性。,研究開發(fā)背景,研究開發(fā)背景,,注射用羅替戈汀緩釋微球是以乙交酯丙交酯共聚物（PLGA）為輔料制成的長效緩釋微球，2周1次肌肉注射，無首過效應(yīng)，維持穩(wěn)態(tài)的血藥水平，持續(xù)刺激多巴胺受體，避免了脈沖式刺激；將會減少服用左旋多巴等藥物引起的運動癥狀波動和運動障礙等，減少患者用藥次數(shù)，增加患者依從性，利于護理。擬定規(guī)格 28mg、56mg和84mg，適應(yīng)癥為早期原發(fā)性帕金森病 。

18、專利產(chǎn)品,PK和PD,LY03003主要藥效研究,LY03003主要藥效研究,LY03003 藥代動力學(xué)研究-大鼠,LY03003 藥代動力學(xué)研究-食蟹猴,LY03003 藥代動力學(xué)研究-大鼠組織分布,羅替戈汀是D3／D2／D1受體激動劑，治療PD的療效和作用機制明確； 單次肌注羅替戈汀微球，在帕金森模型大鼠，藥效可維持13~14天，且第0天和第8天連續(xù)觀察24h，藥效較平穩(wěn)。 食蟹猴一般藥理學(xué)顯示，食蟹猴血壓、心電、呼吸頻率等

19、指標均未見有明顯異常改變，只有QT間期出現(xiàn)一過性的、可恢復(fù)的延長。 羅替戈汀微球無溶血性，無致敏性，肌肉注射引起可恢復(fù)性的慢性炎癥反應(yīng)； 長期毒性試驗顯示較高劑量組動物出現(xiàn)可恢復(fù)的胃損傷（大鼠），腎上腺、胸腺和脾臟等病變（食蟹猴），治療劑量時未顯示明顯的毒性反應(yīng)。 羅替戈汀無明顯致突變作用，所觀察到的生殖毒性和致癌毒性均被認為與催乳素水平降低有關(guān)。 注射用羅替戈汀緩釋微球具有確切的有效性和較高的安全性。,LY03003

20、藥理毒理,已獲中美I期臨床批件，正同步進行美國和中國I期臨床研究，預(yù)計到2015年將完成國際多中心II期臨床研究。有可能首次在國際上實現(xiàn)持續(xù)多巴胺能刺激治療帕金森病，解決臨床治療帕金森病懸而未決的問題。,已獲中美I期臨床批件,微球從實驗室到產(chǎn)業(yè)化—瓶頸,國內(nèi)缺少不同規(guī)格符合藥用質(zhì)量標準的生物可降解聚合物；缺少不同類型和不同規(guī)模的微球制備裝置。工藝放大過程重現(xiàn)性差；從實驗室技術(shù)，發(fā)展到產(chǎn)業(yè)化規(guī)模，期間要逾越很多障礙，即有許多需要解決的

21、關(guān)鍵技術(shù)。進入機體后行為上不全面深入了解，體內(nèi)外相關(guān)性差。各國藥品評審機構(gòu)尚未出臺微球?qū)ｉT審評要求。,注射用微球開發(fā)的關(guān)鍵技術(shù)探討,原輔材料注射用微球的生產(chǎn)工藝放大。專用溶媒質(zhì)量控制標準體內(nèi)外評價安全性評價,原輔材料,原料藥：注射要求。輔料： 國內(nèi)尚無不同規(guī)格藥用PLGA。 對策：采用國外進口。 自行合成申報。,注射用微球的生產(chǎn)工藝放大,從小到大、逐級放大。 體內(nèi)、外同時評

22、價。 不斷調(diào)整工藝參數(shù)。 逐步附加自動化控制系統(tǒng)。 最終設(shè)計并制造了250升中試規(guī)模的微球制備釜及其配套設(shè)備，具備計算機全自動控制系統(tǒng)、自動清洗系統(tǒng)和無菌控制系統(tǒng)，滿足5000支微球制劑規(guī)模的生產(chǎn)。,66,,注射用微球的生產(chǎn)工藝放大,,注射用微球的生產(chǎn)工藝放大,專用溶媒,CMC-Na 除菌,質(zhì)量控制標準,形態(tài)粒度分布混懸與抽針試驗藥物殘留試驗：細菌內(nèi)毒素檢查無菌檢查：有機溶劑殘留載藥量及

23、含量均勻度：,質(zhì)量控制標準,形態(tài),質(zhì)量控制標準,粒度分布：粒徑及粒徑分布為微球注射劑必須控制的檢查項目，它對微球的釋藥模式、釋放速率、含量均勻度、通針性等指標具有很大影響。,質(zhì)量控制標準,混懸與抽針試驗： 取本品1瓶用8號針頭將溶劑注入樣品瓶中，強力振搖至少10秒鐘，應(yīng)形成均勻的混懸液。抽出混懸液至注射器中，排出汽泡后將溶液排出，應(yīng)能順利通過，不得阻塞。藥物殘留試驗： 微球混懸液在注射時在注射器

24、及西林瓶會有一定的殘留（10%左右）。,質(zhì)量控制標準,分子量分布測定 凝膠色譜法。采用四氫呋喃為溶劑及流動相，示差折光檢測器檢測。,XXX微球分子量測定結(jié)果,質(zhì)量控制標準,聚合物的玻璃化轉(zhuǎn)變溫度與晶型,,細菌內(nèi)毒素檢查 粉末和專用溶媒分別進行檢查，也可將粉末和溶媒混合后檢查。無菌檢查： 微球內(nèi)部和表面分別檢查。 吸附在表面：混懸后直接接種培養(yǎng) 包裹在內(nèi)部：溶解后接種培養(yǎng),質(zhì)量控制

25、標準,有機溶劑殘留 微球制備大多使用二類或三類溶劑(乙醇、乙酸乙酯、苯甲醇、二氯甲烷等).,,體內(nèi)外評價,體外釋放度評價： 搖床法、透析法、流通池法（flow-through cell)。 釋放介質(zhì)選擇：體內(nèi)外相關(guān)性原則。 加速試驗方法：體內(nèi)釋藥（藥動學(xué)）評價： 給藥部位殘留量測定，血藥濃度法 高靈敏度的檢測方法（LC-M/SMS, RIA EIA)

26、 微球制劑體內(nèi)釋放度試驗比體外試驗對臨床應(yīng)用 更具有參考價值 PK和PD結(jié)合起來考察藥物的緩釋長效性,體外釋藥試驗,搖床法、透析法、流通池法（flow-through cell),體外釋放介質(zhì)篩選,,時間（d）,,累積釋放,體外加速試驗,時間（d）,累積釋放,安全性評價,作為長期用藥的長效劑型，一般要做至少3個月的長期毒性試驗，以支持臨床試驗。 注射部位刺激性研究，微球制劑除了進行急性局部耐受