農(nóng)藥殘留的快速檢測

1、,,,農(nóng)藥殘留的快速檢測,2,主要內(nèi)容,前言國內(nèi)現(xiàn)行農(nóng)藥殘留快速檢測方法農(nóng)殘快速檢測方法展望,3,一、前言,,隨著人們環(huán)境意識(shí)的不斷加強(qiáng)，由農(nóng)藥引起的食品安全問題也越來越受到人們的關(guān)注。為了保障消費(fèi)者的安全和健康，提高農(nóng)產(chǎn)品的質(zhì)量安全水平，增強(qiáng)農(nóng)業(yè)產(chǎn)品的國際競爭力，我國政府決定加強(qiáng)農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留的監(jiān)控，建立健全農(nóng)藥殘留的檢測體系，實(shí)施對(duì)蔬菜、瓜果、茶葉生產(chǎn)全過程的農(nóng)藥監(jiān)控，從源頭抓起，加強(qiáng)農(nóng)產(chǎn)品的產(chǎn)地檢測，把住農(nóng)產(chǎn)品的市場準(zhǔn)入關(guān)。

2、,4,（一）農(nóng)藥概念 農(nóng)藥(pesticides)是指農(nóng)藥是指用于預(yù)防、消滅或者控制危害農(nóng)業(yè)、林業(yè)的病、蟲、草及其他有害生物，以及有目的地調(diào)節(jié)植物、昆蟲生長的藥物的通稱。 現(xiàn)在農(nóng)藥不僅應(yīng)用于農(nóng)業(yè)，而且也廣泛應(yīng)用于畜牧業(yè)、林業(yè)和公共衛(wèi)生事業(yè)等方面。,5,（二）農(nóng)藥殘留的概念,農(nóng)藥殘留是指農(nóng)藥使用后殘存于生物體、食品(農(nóng)副產(chǎn)品)和環(huán)境中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱。,6,（三）農(nóng)藥的

3、分類,1.按化學(xué)成分可分為有機(jī)氯、有機(jī)磷、氨基甲酸酯類、擬除蟲菊酯類及砷、汞、銅、硫磺等制劑。 2.按用途可分為殺蟲劑、殺菌劑、除草劑、植物生長調(diào)節(jié)劑和糧食熏蒸劑等。,7,（四）農(nóng)藥的毒性及種類,農(nóng)藥除了可造成人體的急性中毒外，絕大多數(shù)對(duì)人體產(chǎn)生的慢性危害，多是通過污染食品的形式造成。某些農(nóng)藥對(duì)人和動(dòng)物的遺傳和生殖造成影響，產(chǎn)生畸形和引 起癌癥等方面的毒素作用。,8,1、有機(jī)氯農(nóng)藥,容易在人體內(nèi)蓄積慢性毒性作用，主

4、要表現(xiàn)在侵害肝、腎及神經(jīng)系統(tǒng)，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)證實(shí)有致畸、致癌作用我國1983年停止生產(chǎn)，1984年停止使用這類農(nóng)藥,9,六六六，BHC,滴滴涕，DDT,10,滴滴涕：減少了蛋殼的厚度，從而降低了小鳥的孵出率。二惡英：進(jìn)入機(jī)體后幾乎不被排泄、沉積在肝臟和脂肪組織中。屬于劇毒物質(zhì)，毒性比氰化鉀高50—1000倍，致癌毒性比黃曲霉毒素高10倍，會(huì)引起基因突變，影響繁殖力和智力發(fā)育。,11,早期的高效高毒品種：對(duì)硫磷（1605）、甲拌磷（39

5、11）、內(nèi)吸磷（1059）后期使用得較多的為高效低毒低殘留的品種，如：樂果、敵百蟲、殺螟松、倍硫磷毒性極低的馬拉硫磷、雙硫磷、氯硫磷、鋅硫磷、碘硫磷、地亞農(nóng)、滅蜈松,2、有機(jī)磷農(nóng)藥,12,有機(jī)磷農(nóng)藥主要品種,甲胺磷,乙酰甲胺磷,13,樂 果,一六0五,14,急性毒性：有機(jī)磷農(nóng)藥化學(xué)性質(zhì)不穩(wěn)定，分解快，在作物中殘留時(shí)間短。抑制血液和組織中膽堿酯酶的活性，引起乙酰膽堿在體內(nèi)大量積聚而出現(xiàn)一系列神經(jīng)中毒癥狀，如神經(jīng)功能紊亂、出汗、

6、震顫，精神錯(cuò)亂、語言失常等。,15,主要表現(xiàn)為植物性食物殘留，尤其是含有芳香物質(zhì)的植物如：水果、蔬菜，特別是葉菜類如小白菜、大白菜、雞毛菜、甘藍(lán)、芹菜、韭菜、芥菜、花菜、綠花菜、茼蒿、枸杞菜和黃瓜等,16,3、氨基甲酸酯類農(nóng)藥,西維因、殺滅威、速滅威、葉蟬散等除草劑：敵草隆、敵稗 在作物上的殘留時(shí)間為4d，在動(dòng)物的肌肉和脂肪中的明顯蓄積時(shí)間約為7d殘留量很低,17,氨基甲酸酯類殺蟲劑進(jìn)入人體內(nèi)，在胃中酸性條件下可與食物中的

7、亞硝酸鹽和硝酸鹽反應(yīng)生成亞硝基化合物，具有致癌性。,,（五）傳統(tǒng)農(nóng)殘分析技術(shù)一般過程,19,,（六）傳統(tǒng)農(nóng)殘分析技術(shù)的優(yōu)缺點(diǎn),20,傳統(tǒng)的農(nóng)殘化學(xué)分析主要是氣相或液相色譜等儀器 優(yōu)點(diǎn)：敏感(10－l2 ～10－6 mol／L) 、準(zhǔn)確 缺點(diǎn)：操作復(fù)雜、費(fèi)時(shí)及成本高。 難以滿足需求 －－怎么辦？

8、 －－發(fā)展適合我國的快速檢測技術(shù),,21,生化檢測生物檢測化學(xué)比色法,二、適合我國的農(nóng)藥殘留快速檢測方法,,酶抑制法,免疫分析法,,發(fā)光菌檢測法,敏感家蠅檢測法,,速測卡,速測儀,主要為酶免疫法,22,酶抑制法,酶抑制技術(shù)是研究比較成熟、應(yīng)用最廣 泛快速的農(nóng)藥殘留檢測技術(shù)，是根據(jù)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)乙酰膽堿酯酶（AChE)的特異性生化反應(yīng)建立起來的農(nóng)藥殘留的微量和痕量快速檢測技術(shù)。,23,1、速測卡法,,24,

9、速測卡檢測結(jié)果,“-”陰性（藍(lán)色） “+”弱陽性（淡藍(lán)） “++”強(qiáng)陽性（白色）,25,2、速測儀,原理:在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。酶催化乙酰膽堿水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)。 用分光光度計(jì)在412nm處測定吸光度隨時(shí)間的變化，計(jì)算出抑制率，通過抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的存在。,,26,農(nóng)藥殘留快速測試

10、儀,27,速測儀檢測結(jié)果,抑制率與農(nóng)藥殘留量成正相關(guān)，抑制率越高說明殘留量越高,28,免疫分析技術(shù),免疫分析技術(shù)是將免疫反應(yīng)與現(xiàn)代測試手段相結(jié)合而建立的超微量分析技術(shù)，是基于抗原抗體特異性結(jié)合和反應(yīng)為基礎(chǔ)的分析方法。目前應(yīng)用于農(nóng)殘檢測的是酶免疫分析(EIA)和放射性免疫分析(RIA)。其中酶聯(lián)免疫分析技術(shù)應(yīng)用最為普遍。,29,3、酶聯(lián)免疫技術(shù) ELISA是一種以酶作為標(biāo)記物的免疫分析方法，也是目前應(yīng)用最廣泛的

11、免疫分析方法之一，它將酶標(biāo)記在抗體／抗原分子上形成酶標(biāo)抗體／酶標(biāo)抗原，酶作用于能呈現(xiàn)出顏色的底物，通過儀器或肉眼進(jìn)行辨別。,30,ELISA法基本原理是預(yù)先結(jié)合在固相載體上的抗體或抗原分子與樣品中的抗原或抗體分子在一定條件下進(jìn)行免疫學(xué)反應(yīng)。該法因不需昂貴儀器設(shè)備，對(duì)人體無害等優(yōu)點(diǎn)而被廣泛采用，具有靈敏、特異、快速、穩(wěn)定以及易于自動(dòng)化操作等特點(diǎn)。,31,目前，ELISA方法常用的固相載體是96孔聚苯乙烯酶標(biāo)板，常用的酶是辣根過氧化物酶，

12、常用的底物是鄰苯二胺和四甲基聯(lián)苯胺等。,酶標(biāo)板 u型 96孔,32,4、發(fā)光菌檢測法,農(nóng)藥與細(xì)菌作用后可影響細(xì)菌的發(fā)光程度，通過細(xì)菌發(fā)光情況，可測出農(nóng)藥殘留量。 此方法簡便但是特異性差,33,5、敏感家蠅檢測法,敏感家蠅對(duì)殺蟲劑具有敏感性，記錄家蠅存活情況，根據(jù)家蠅的死亡率可知農(nóng)藥殘留情況。該技術(shù)方法直接、過程簡單、容易掌握，但定性粗糙，只對(duì)少數(shù)農(nóng)藥有效，而且由于其他生物對(duì)不同農(nóng)藥的毒性反應(yīng)與人畜可能不同，因此影響對(duì)農(nóng)藥殘留

13、量的判斷。如家蠅對(duì)毒性較低的除蟲菊酯類敏感，遠(yuǎn)超過有機(jī)磷和氨基甲酸酯類中毒或高毒的農(nóng)藥。,34,6、化學(xué)比色法,目前常用的化學(xué)比色法包括各種檢測試劑和試紙，兩者都是利用迅速產(chǎn)生明顯顏色的化學(xué)反應(yīng)檢測待測物質(zhì)，可通過與標(biāo)準(zhǔn)比色卡比較進(jìn)行目視定性或半定量分析。,35,化學(xué)比色分析法與一般的儀器分析方法相比，具有價(jià)格低，操作相對(duì)簡便，結(jié)果顯示直觀，一次性使用，不需檢修維護(hù)，有一定的靈敏度和專一性等優(yōu)點(diǎn)。隨著檢測儀器的不斷發(fā)展，與其相配套的微型

14、檢測儀器也相應(yīng)出現(xiàn)。如與試劑檢測方法相配套的微型光電比色計(jì)目前已發(fā)展得比較成熟。,36,三、農(nóng)藥殘留快速檢測技術(shù)展望,一些快速速檢測方法與國家標(biāo)準(zhǔn)方法和儀器法相比具有操作簡單、快速的優(yōu)點(diǎn)，但由于大多數(shù)快速檢測方法在食品樣品前處理、操作規(guī)范性方面還有許多待完善之處，目前還只能作為快速篩選的手段而不能作為最終診斷的依據(jù)，兼具快速和準(zhǔn)確兩大優(yōu)點(diǎn)是快速檢測方法追求的目標(biāo)。,37,目前的食品現(xiàn)場快速檢測主要呈現(xiàn)4大趨勢：1 由于高新技術(shù)的應(yīng)用，

15、檢測能力不斷提高，檢測靈敏度越來越高，殘留物的超痕量分析水平已達(dá)到了10-7g2 檢測速度不斷加快，智能化芯片和高速電子器件與檢測器的使用，使食品安全檢測周期大大縮短3 選擇性不斷提高，高效分離分段、各種化學(xué)和生物選擇性傳感器的使用，使在復(fù)雜混合體中直接進(jìn)行污染物選擇性測定成為可能；4 由于微電子技術(shù)、生物傳感器、智能制造技術(shù)應(yīng)用，檢測儀器向小型化、便攜化方向發(fā)展，使實(shí)時(shí)、現(xiàn)場、動(dòng)態(tài)、快速檢測正在成為現(xiàn)實(shí)。針對(duì)我國的特殊國情，目前

16、我國基層單位很多速測技術(shù)的應(yīng)用還只處于定性或半定量水平，易用型的小型化儀器的應(yīng)用是目前和今后快速檢測技術(shù)的發(fā)展趨勢。,38,儀器分析技術(shù)中的色譜技術(shù)被認(rèn)為是最經(jīng)典、最常用的檢測技術(shù)。傳統(tǒng)色譜檢測時(shí)長、成本高，需要加快在樣品預(yù)處理技術(shù)和檢測技術(shù)方面的研究。如樣本預(yù)處理技術(shù)中的固相萃取（SPE）技術(shù)和微固相萃?。⊿PME)技術(shù)以及超臨界流體萃取技術(shù)方面的研究，檢測技術(shù)方面的二維色譜技術(shù)的研究。,5 儀器分析在農(nóng)藥殘留快速檢測方面的進(jìn)展,食品