t細胞斑點試驗

1、結(jié)核的現(xiàn)狀,,結(jié)核病是全球嚴重的公共衛(wèi)生問題之一。據(jù)WHO統(tǒng)計，全球約有20億人感染結(jié)核分枝桿菌，每年有約200萬人死于結(jié)核。 我國是世界上22個結(jié)核病高負擔國家之一，結(jié)核感染導致的死亡人數(shù)是其他傳染性疾病總死亡人數(shù)的2倍以上。,結(jié)核的傳統(tǒng)診斷手段,,結(jié)核菌素皮試：低敏感性：免疫力低下人群中其敏感性大大降低。低特異性：與卡介苗接種和其他環(huán)境分枝桿菌有交叉，易造成“假陽性”結(jié)果。細菌學檢查：常規(guī)培養(yǎng)：2月；快速培養(yǎng)：1

2、周； 陽性率取決于采集標本中細菌數(shù)量，不利于早期診斷。病理學檢查：陽性率低，對取材標本有較高要求，有創(chuàng)傷，對肉芽腫性病變需進一步鑒別。,基于T淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,結(jié)核感染的免疫應答反應以細胞免疫為主，結(jié)核感染后體內(nèi)長期存在抗原特異性的記憶性T細胞當再次遇到抗原刺激時，能迅速活化增殖，釋放r干擾素r干擾素是結(jié)核分枝桿菌感染后機體免疫應答中最重要的細胞因子,基于T淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,T-SPOT.TB技術(shù)：利用結(jié)核

3、桿菌感染者外周血單個核細胞（PBMC）中存在結(jié)核特異性T細胞，這些淋巴細胞在受到結(jié)核特異 抗原刺激后分泌r干擾素而設計的T細胞免疫斑點試驗。檢測外周血中受結(jié)核特異抗原刺激釋放r干擾素的T淋巴細胞，經(jīng)酶聯(lián)免疫顯色后，通過ELISPOT分析系統(tǒng) 對斑點進行計數(shù)，1個斑點代表一個細胞，計算出抗原特異性細胞的頻率。,基于T淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,,,,包,基于T淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,,,,基于T淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,,

4、,,基于T淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,空白對照孔內(nèi)斑點數(shù)小于10且陽性對照孔內(nèi)斑點數(shù)大于20時視為試驗有效T-SPOT.TB試驗結(jié)果用每106 PBMCs中斑點形成細胞（SFCs）的數(shù)目來描述，即SFCs/106 PBMCs,T-SPOT.TB的臨床意義,T-SPOT.TB高靈敏度,T-SPOT.TB的臨床意義,,,,T-SPOT.TB的臨床意義,T-SPOT.TB高特異性 ESAT-6＆CFP 10均來自結(jié)核分枝桿菌

5、基因組RD1區(qū)域 僅結(jié)核分枝桿菌復合群（人型、牛型、非洲型）存在 RD1區(qū)基因 卡介苗和大多數(shù)環(huán)境分枝桿菌缺失RD1區(qū)基因 T-SPOT.TB不會受卡介苗接種影響,T-SPOT.TB的臨床意義,,,,基于T淋巴細胞檢測結(jié)核感染的原理,T-SPOT.TB在診斷結(jié)核感染方面具有良好的敏感性和特異性，在現(xiàn)有結(jié)核診斷方法存在缺陷的今天， T-SPOT.TB 可以給臨床診斷提供參考?；诮Y(jié)核抗原特異