壬基酚對(duì)波紋巴非蛤和菲律賓蛤仔的毒性效應(yīng).pdf

1、壬基酚(nonylphenol,NP)是烷基酚類(lèi)化合物中最有代表性的環(huán)境雌激素(Evironmental Estrogen),是一種確定的環(huán)境內(nèi)分泌干擾物(Endocrine disrupting chemicals或Endocrine disrupting,簡(jiǎn)稱(chēng)為EDC或ED)。NP一直廣泛應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)中,通過(guò)生活和工業(yè)污水排放到環(huán)境中,經(jīng)過(guò)生物富集最終作用于水生生物和人體,對(duì)人類(lèi)健康產(chǎn)生巨大的危害。隨著環(huán)境激素在全球范圍的廣泛應(yīng)用

2、,環(huán)境激素污染問(wèn)題已經(jīng)成為國(guó)際環(huán)境科學(xué)的熱點(diǎn)問(wèn)題之一。
　　本文研究了NP脅迫下和凈水釋放后波紋巴非蛤外套膜和內(nèi)臟團(tuán)抗氧化防御系統(tǒng)(SOD、POD、GSH、MDA);菲律賓蛤仔內(nèi)臟團(tuán)抗氧化防御系統(tǒng)(SOD、CAT、POD、GSH、 GST、MDA),(Cu/Zn-SOD、GST-pi、VpGPx、CYP、RpAhR)五種基因基因表達(dá)量的變化趨勢(shì),并通過(guò)組織石蠟切片觀察NP脅迫后菲律賓蛤仔外套膜和鰓的組織病理學(xué)損傷情況來(lái)研究NP對(duì)受

3、試生物的毒性作用和恢復(fù)狀況。主要研究結(jié)果如下:
　　1、壬基酚對(duì)波紋巴非蛤的外套膜和內(nèi)臟團(tuán)抗氧化防御系統(tǒng)的長(zhǎng)期毒性研究
　　NP對(duì)波紋巴非蛤的96 h半致死濃度(96h LC50),為0.26 mg· L-1;根據(jù)急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果,以96h LC50的1/10設(shè)置長(zhǎng)期曝毒的最高濃度組,慢性實(shí)驗(yàn)曝毒濃度設(shè)置低(1μg· L-1)、中(10μg· L-1)和高(25μg· L-1)3個(gè)NP質(zhì)量濃度組和空白對(duì)照組。
　　脅迫

4、初期,低、中濃度組的波紋巴非蛤內(nèi)臟團(tuán)SOD活性被極顯著抑制(P<0.01),而POD活性則被極顯著誘導(dǎo)(P<0.01),表現(xiàn)為典型的“毒性興奮效應(yīng)”。脅迫過(guò)程中,低、中濃度組波紋巴非蛤內(nèi)臟團(tuán)的SOD活性和GSH含量呈先下降后上升的趨勢(shì),而POD活性和MDA含量則呈先上升后下降的趨勢(shì);高濃度組SOD活性呈先抑制后誘導(dǎo)的趨勢(shì),POD活性和MDA含量呈先下降后升高再降低的趨勢(shì),而GSH含量則一直顯著高于對(duì)照組。脅迫解除后,低、中濃度組的各種指

5、標(biāo)逐漸恢復(fù)到對(duì)照組水平,但高濃度組與對(duì)照組仍存在著極顯著性的差異。
　　NP脅迫下菲律賓蛤仔外套膜SOD活性在1 d時(shí)只有低濃度被輕度抑制,隨后其總體呈現(xiàn)先誘導(dǎo)后抑制的變化趨勢(shì);POD活性在整個(gè)脅迫期間只有15 d的低、中濃度組被抑制,其他時(shí)間各濃度組幾乎均呈誘導(dǎo)狀態(tài);GSH含量在1 d和7 d基本上低于對(duì)照組,隨著脅迫至15 d時(shí),三個(gè)濃度組的GSH含量均顯著性高于對(duì)照組;MDA含量在脅迫1 d時(shí)沒(méi)有變化,低濃度組只在7 d出現(xiàn)

6、低于對(duì)照組的現(xiàn)象,中濃度組在3d時(shí)低于對(duì)照組,之后一直高于對(duì)照組,高濃度組則在3、7d時(shí)高于對(duì)照組。釋放結(jié)束后,低濃度組全部恢復(fù)正常;中高濃度組只有GSH含量恢復(fù)情況較好,其他三個(gè)指標(biāo)恢復(fù)程度均不理想。
　　2、壬基酚對(duì)菲律賓蛤仔內(nèi)臟團(tuán)抗氧化防御系統(tǒng)的長(zhǎng)期毒性研究
　　NP對(duì)菲律賓蛤仔的96h LC50,為0.469mg· L-1。長(zhǎng)期曝毒實(shí)驗(yàn)濃度設(shè)置A(1.6μg· L-1)、B(5.04μg· L-1)、C(15.88μ

7、g· L-1)和D(50μg· L-1)4個(gè)NP質(zhì)量濃度組和空白對(duì)照組。
　　脅迫期間:菲律賓蛤仔內(nèi)臟團(tuán)SOD活性呈先誘導(dǎo)后抑制再升高的變化趨勢(shì),15 d時(shí)只有D濃度組的SOD活性略有升高。CAT和POD活性各個(gè)濃度組變化趨勢(shì)劑量-效應(yīng)不明顯,15 d時(shí)兩種酶活性幾乎均被誘導(dǎo)。GST活性呈現(xiàn)先誘導(dǎo)后抑制的變換趨勢(shì),15 d時(shí)GST活性被極顯著抑制(P<0.01);GSH含量則呈現(xiàn)先降低后上升的變化趨勢(shì),15 d時(shí)D濃度組GSH含量

8、極顯著低于對(duì)照組(P<0.01),其他三組GSH含量則被大大積累。MDA含量變化在前期劑量效應(yīng)不明顯,7 d后則呈現(xiàn)明顯的劑量效應(yīng),各個(gè)濃度組MDA含量均極顯著高于對(duì)照組(P<0.01)。釋放期間:釋放15 d后只有A濃度組POD活性恢復(fù)正常,其他四個(gè)濃度組的各項(xiàng)指標(biāo)均未恢復(fù)正常。
　　3、壬基酚對(duì)菲律賓蛤仔內(nèi)臟團(tuán)中五種基因mRNA基因表達(dá)量的影響
　　菲律賓蛤仔內(nèi)臟團(tuán)中的Cu/Zn-SOD、GST-pi、VpGPx、CYP

9、和RpAhR基因的相對(duì)表達(dá)量在A(1.6μg· L-1)、B(5.04μg· L-1)、C(15.88μg· L-1)和D(50μg· L-1)四個(gè)濃度NP脅迫下均有顯著的變化趨勢(shì)。
　　脅迫期間:Cu/Zn-SOD表達(dá)量呈現(xiàn)抑制后誘導(dǎo)再抑制的變化趨勢(shì),15 d時(shí)的抑制率越低于7 d時(shí)。GST-pi、VpGPx和RpAhR三個(gè)基因的相對(duì)表達(dá)量均呈現(xiàn)升高后降低的變化趨勢(shì),15 d時(shí)三個(gè)基因的相對(duì)表達(dá)量均極顯著低于對(duì)照組,其中RpAh

10、R含量的降低程度最大。CYP相對(duì)表達(dá)量的劑量-效應(yīng)不明顯,15 d時(shí)各個(gè)濃度組CYP相對(duì)表達(dá)量均極顯著低于對(duì)照組(P<0.01)。脅迫解除后雖然個(gè)別濃度組的基因相對(duì)表達(dá)量在釋放期間略有升高,但經(jīng)歷15 d的凈水釋放后,五個(gè)基因的相對(duì)表達(dá)量均顯著低于對(duì)照組。
　　4、壬基酚對(duì)菲律賓蛤仔外套膜和鰓的組織病理?yè)p傷
　　菲律賓蛤仔外套膜和鰓在不同濃度NP脅迫下均有組織病理?yè)p傷,且隨著脅迫濃度的增加而受損加深。外套膜在長(zhǎng)期染毒后較對(duì)照