球孢白僵菌對(duì)家蠶安全性研究.pdf

1、家蠶是世界上最重要的資源昆蟲(chóng)之一，而由球孢白僵菌引起的家蠶白僵病是影響蠶業(yè)生產(chǎn)的重要因素之一。球孢白僵菌是一種最常見(jiàn)的蟲(chóng)生真菌，因其寄主范圍廣范，易于大量生產(chǎn)，現(xiàn)已開(kāi)發(fā)為真菌殺蟲(chóng)劑在害蟲(chóng)生物防治中廣泛使用。由于人們一直擔(dān)心大面積使用（特別是在桑蠶養(yǎng)殖區(qū)）白僵菌防治害蟲(chóng)會(huì)對(duì)蠶業(yè)帶來(lái)危害，因此查明家蠶白僵病來(lái)源和傳播途徑對(duì)于控制蠶病流行至關(guān)重要。
　　 本研究對(duì)皖西南潛山縣和皖南涇縣的病蠶、蠶室及其周邊桑園、農(nóng)田及松林進(jìn)行了調(diào)查采樣

2、。應(yīng)用ISSR分子標(biāo)記分別對(duì)采集的126株球孢白僵菌進(jìn)行聚類(lèi)分析和主坐標(biāo)分析，并且對(duì)它們及用于防治松毛蟲(chóng)的菌株進(jìn)行種群遺傳結(jié)構(gòu)分析，同時(shí)還將兩地采集的家蠶和松毛蟲(chóng)分離株對(duì)家蠶的毒力進(jìn)行生物測(cè)定。
　　 結(jié)果：表明，兩個(gè)地區(qū)的球孢白僵菌種群均為異質(zhì)性明顯的種群。
　　 對(duì)于在潛山縣蠶區(qū)采集的77株白僵菌菌株的遺傳多樣性研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：篩選出來(lái)的10個(gè)ISSR引物共擴(kuò)增出99條帶，多態(tài)位點(diǎn)百分率高達(dá)87.9％。UPGMA聚類(lèi)分

3、析表明，該白僵菌種群為異質(zhì)性明顯的種群，77株白僵菌可分為6個(gè)類(lèi)群；主坐標(biāo)分析將家蠶分離株所在的第二類(lèi)群進(jìn)一步劃分為兩個(gè)亞群，其中僅主病源第Ⅱ-1類(lèi)群和次病源第Ⅳ類(lèi)群引起家蠶的地方性白僵病；遺傳距離和遺傳分化分析也表現(xiàn)出相同結(jié)果。用于防治松毛蟲(chóng)的菌株及在附近松毛蟲(chóng)種群中自然流行的土著菌株與Ⅱ-1和Ⅳ的親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，它們不是家蠶白僵病的病源。另外，在潛山蠶室附近引起螳螂類(lèi)群流行病的類(lèi)群也與蠶病類(lèi)群無(wú)關(guān)。
　　 對(duì)于在涇縣章渡蠶區(qū)采

4、集的49株白僵菌菌株的遺傳多樣性分析表明，10個(gè)ISSR引物共擴(kuò)增出96條帶，多態(tài)位點(diǎn)百分率達(dá)70.8％。UPGMA聚類(lèi)分析和主坐標(biāo)分析結(jié)果表明，該白僵菌種群也是異質(zhì)性明顯的種群，49株白僵菌可嚴(yán)格按照寄主分為三大類(lèi)群，各類(lèi)群體內(nèi)菌株的遺傳相似性較高，而各類(lèi)群之間遺傳相似性很低。遺傳距離和遺傳分化分析表明，家蠶分離株亞種群與松毛蟲(chóng)亞種群以及附近其他僵蟲(chóng)亞種群相對(duì)獨(dú)立。兩者間遺傳距離較遠(yuǎn)，基因流較小，產(chǎn)生高度的遺傳分化，說(shuō)明它們不僅與當(dāng)時(shí)

5、的家蠶白僵病無(wú)關(guān)，而且也不會(huì)與家蠶病原株發(fā)生基因交換以致引起寄主范圍的變化或?qū)倚Q致病性的增強(qiáng)。
　　 采用兩種方法對(duì)家蠶進(jìn)行生物測(cè)定的結(jié)果表明，家蠶分離株處理蠶體后對(duì)家蠶14d的累積死亡率達(dá)到了87.5％-100％，而松毛蟲(chóng)分離株處理蠶體后對(duì)家蠶14d的累積死亡率僅為12.5％-27.5％。使用松毛蟲(chóng)分離株使家蠶死亡25％的LC25、LD25和LT50分別為使用家蠶分離株使家蠶死亡75％的LC75、LD75和LT75的1327

6、、1378和1.5倍。這進(jìn)一步說(shuō)明在蠶區(qū)使用由松毛蟲(chóng)分離株研制的白僵菌殺蟲(chóng)劑防治松毛蟲(chóng)對(duì)蠶業(yè)是安全的。
　　 兩個(gè)地區(qū)家蠶白僵病病源比較分析表明，兩個(gè)白僵菌種群皆為異質(zhì)種群，但潛山地區(qū)蠶病亞種群是多源的，而涇縣地區(qū)蠶病亞種群是單源的。涇縣蠶病亞種群和潛山的蠶病優(yōu)勢(shì)亞種群具有典型的地方性：只在蠶室內(nèi)循環(huán)侵染家蠶，引起其低頻常在性的地方性白僵?。欢鴿撋降姆莾?yōu)勢(shì)亞種群可以在蠶室外的某些轉(zhuǎn)主寄主中傳播。在潛山和涇縣當(dāng)?shù)亓餍械耐林捉┚?/p>

7、株和兩個(gè)白僵菌生產(chǎn)菌株以及在周?chē)h(huán)境中流行的螳螂分離株對(duì)桑蠶業(yè)均是安全的。
　　 兩個(gè)地區(qū)白僵菌種群的遺傳結(jié)構(gòu)分析表明，潛山白僵菌種群以及家蠶白僵病病源亞種群的遺傳異質(zhì)性均高于涇縣章渡種群。潛山種群，尤其是家蠶白僵病病源亞種群的基因流弱、遺傳分化大，變異主要由各亞種群間的變異以及蠶病亞種群的各小群體間的變異造成；而涇縣的種群和亞種群基因流強(qiáng)、遺傳分化小，變異主要由亞種群內(nèi)的變異以及蠶病亞種群的各小群體內(nèi)的變異造成。這種差異與兩地