云南野生八角茴香中莽草酸含量測定

1、<p>　　云南野生八角茴香中莽草酸含量測定</p><p>　　作者：張志信 李洪潮 胡國海 張仕秀 宋建平</p><p>　　【摘要】 　　目的對云南省分布于文山、楚雄地區(qū)的野生八角茴香中的莽草酸含量進行分析。方法采用紫外分光光度法，檢測波長213nm，測定野生八角茴香中莽草酸的含量，并與文山富寧的種植八角茴香的莽草酸含量進行對比。結果平均回收率為102.25%，RSD為

2、2.576%。結論富寧的八角是提取莽草酸的優(yōu)質原料。 </p><p>　　【關鍵詞】 八角 莽草酸 紫外分光光度法</p><p>　　八角Illicium verum Hook f.是八角科植物八角茴香的干燥成熟果實，主產(chǎn)于我國的廣西和云南等省區(qū)和東南亞，是一種重要的辛香料［1］。八角果實中含有的莽草酸，具有抗炎、鎮(zhèn)痛作用，是抗病毒和抗癌藥物中間體，莽草酸的最新應用是用于制造抗禽流感

3、藥物“達菲”的重要原料。野生八角茴香主要生長在云貴川等地海拔400～600 m左右的山區(qū)，年產(chǎn)量約600 t左右，野生八角有一定的毒性，不能直接食用，但它的莽草酸含量卻高達10%以上，故多用于工業(yè)提取莽草酸［2］。富寧縣是八角之鄉(xiāng)，平均年產(chǎn)量為1 300 t，八角油年產(chǎn)200 t以上，栽培面積居全國縣級種植面積的第3位，產(chǎn)量居第2位，質量則居第1位。本實驗通過測定云南省不同地方的野生八角中莽草酸含量，并與云南省的八角主產(chǎn)區(qū)富寧種植八角中

4、的莽草酸含量進行比較，為云南省八角茴香資源的開發(fā)提供科學依據(jù)。</p><p><b>　　1 儀器與材料</b></p><p>　　1.1 儀器KQ2200型超聲波儀（昆山市超聲儀器有限公司）；UV—2501紫外分光光度計（日本島津）；AEL-40SM十萬分之一天平（日本島津）；干燥箱CS-101-2CS（重慶實驗儀器廠）；R201D—Ⅱ型旋轉蒸發(fā)儀（上海申順

5、生物科技有限公司）；DAF—6050真空干燥箱（上海新苗醫(yī)療器械制造有限公司）。</p><p>　　1.2 材料與試劑野八角分別于2007-10采自西疇、馬關、武定，種植八角采自富寧，經(jīng)云南文山師范高等?？茖W校生化系沐建華講師鑒定無誤，于105℃烘至恒重，粉碎，過60目篩備用；莽草酸對照品購于中國藥品生物制品檢定所；其它試劑均為分析純。</p><p><b>　　2 方法

6、</b></p><p>　　2.1 超聲提取精確稱取2.000 0 g八角茴香粉末于50 ml錐形瓶中， 以水為溶劑，按各種設定條件（時間， 料液比，提取次數(shù)）進行超聲提取， 提取液減壓抽濾，合并濾液于旋轉蒸發(fā)儀中濃縮至浸膏，浸膏2次用醋酸乙酯20 ml于50℃浸泡數(shù)分鐘， 傾去上層清液， 殘留物２次用丙酮20 ml回流數(shù)分鐘， 抽濾， 真空干燥，加甲醇溶解于50 ml容量瓶中， 于213 nm測

7、定吸光度。</p><p>　　2.2 莽草酸含量測定</p><p>　　2.2.1 標準曲線的繪制［3］精確稱取10.0 mg莽草酸對照品于50 ml容量瓶中，以甲醇溶解，定容至刻度，得0.2 mg/ml莽草酸標準溶液。精確吸取0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0 ml，分別置于10 ml容量瓶中，甲醇定容至刻度，于213nm處測得的吸光度A對莽草酸濃度C回歸，得回歸方程：A

8、=39.294C + 0.004 8，r=0.999 7，在4～20 μg/ml的范圍內，莽草酸濃度C對吸光度A有良好的線性關系。</p><p>　　2.2.2 樣品含量測定取提取物的甲醇溶液于1 ml，按“2.2.1”項下方法測定樣品含量。樣品含量的計算公式為：</p><p>　　莽草酸含量（mg/g干重）=50CW</p><p>　　式中C為提取物甲醇溶

9、液的莽草酸濃度（mg/ml）；W為樣品質量（g）。</p><p>　　2.3 回收率的測定準確稱取武定采收的野八角樣品2 g，共3份，分別加入一定量的莽草酸對照品，按“2.2.1”項操作。用紫外分光光度計測定吸光度，得出莽草酸含量，根據(jù)回收率公式計算出回收率。</p><p>　　回收率（%）=（混合后測得莽草酸含量-樣品中莽草酸含量）莽草酸對照品加入量×100%</p

10、><p>　　2.4 精密度實驗精密稱取富寧采收的種植八角茴香樣品2 g，共6份，按“2.1”及“2.2”項下方法測定莽草酸含量。</p><p><b>　　3 結果</b></p><p>　　3.1 超聲作用時間對莽草酸提取率的影響為了探討超聲作用時間對莽草酸提取效果的影響，取2 g富寧種植八角樣品，加入80 ml蒸餾水，水浴溫度70℃

11、，采用不同超聲時間提取3次，按“2.1”及“2.2”項下測定莽草酸含量。結果見表1。</p><p>　　表1 超聲作用時間對莽草酸提取率的影響（略）</p><p>　　由表1可以看出，隨著超聲時間的增加，提取率不斷提高，當超聲40 min時，莽草酸的提取率最高，繼續(xù)超聲則莽草酸的提取率呈現(xiàn)下降趨勢，這可能是由于超聲時間過長，導致熔劑揮發(fā)而造成的。故根據(jù)實驗結果選擇每次超聲作用時間為4

12、0 min。</p><p>　　3.2 提取溫度對莽草酸提取率的影響為了溫度對莽草酸提取效果的影響，在其它條件相同的情況下，僅改變超聲提取水浴溫度，按“2.1”及“2.2”項下測定莽草酸含量。結果見表2。</p><p>　　表2 提取溫度對莽草酸提取率的影響（略）</p><p>　　由表2可以看出，隨著超聲提取水浴溫度的上升，莽草酸的提取率呈現(xiàn)上升趨勢，但

13、當超聲提取水浴溫度超過70℃，熔劑的揮發(fā)量急劇加快，導致提取率下降，根據(jù)實驗結果確定超聲提取水浴溫度為70℃。</p><p>　　3.3 液料比對莽草酸提取率的影響為了探討液料比對莽草酸提取效果的影響，在其它條件相同的情況下，僅改變水和樣品的體積質量比。結果見表3。</p><p>　　表3 液料比對莽草酸提取率的影響（略）</p><p>　　由表3可以看出

14、，當液料比為（ml∶g）40 ∶1時，莽草酸的提取率最高。液料比太小，溶劑不足以溶解足夠多的溶質；而液料比太大，會增加超聲波破碎細胞的阻力，使細胞破碎程度下降，從而降低莽草酸的提取率。綜上所述，根據(jù)實驗結果，選擇液料比為40 ∶1。</p><p>　　3.4 超聲提取次數(shù)對莽草酸提取率的影響為了探討超聲作用次數(shù)對莽草酸提取效果的影響，取2 g樣品，加入40 ml蒸餾水，水浴溫度70℃，每次超聲時間40 min

15、，分別提取1，2，3次，按“2.1”及“2.2”項下測定莽草酸含量。結果見表4。</p><p>　　表4 超聲提取次數(shù)對莽草酸提取率的影響（略）</p><p>　　從表4可以看出，隨著提取次數(shù)的增加，莽草酸的提取率呈現(xiàn)增加趨勢，對樣品提取3次，樣品中的莽草酸基本提取完全，本實驗選擇超聲提取3次。</p><p>　　3.5 八角茴香中莽草酸含量測定分別稱取不

16、同產(chǎn)地的八角茴香干粉3份，每份2 g，采用每次超聲40 min，液料比（ml∶g）為40∶1，提取水浴溫度70℃，提取3次的工藝進行提取，按“2.1”和“2.2”項下方法進行提取和測定。結果見表5。</p><p>　　表5 不同產(chǎn)地八角茴香中莽草酸的含量測定結果（略）</p><p>　　3.6 樣品回收率實驗以富寧種植八角茴香樣品2 g進行回收率實驗，結果見表6。由表6可以看出本實

17、驗的平均回收率為102.25%，RSD為2.576%。</p><p>　　表6 回收率實驗結果（略）</p><p>　　3.7 精密度實驗精密度實驗結果見表7。從表7可以看出，相對標準偏差為0.201 1 %，結果顯示重現(xiàn)性較好，精密度較高。</p><p>　　表7 精密度實驗結果（略）</p><p><b>　　4

18、 結論</b></p><p>　　通過對3種產(chǎn)地不同的野生八角茴香中的莽草酸含量進行測定，武定產(chǎn)的野生八角茴香的莽草酸含量最高達135.05mg/g(干重)，而產(chǎn)于西疇、馬關的莽草酸含量稍低一些，分別為126.32和121.51mg/g（干重)，可以作為提取莽草酸的原料。</p><p>　　通過對富寧種植八角茴香中莽草酸含量的測定，其含量為110.46mg/g（干重)，與野

19、生八角相比低一些，但來源可靠，通過利用富寧種植八角茴香作為提取莽草酸的原料，使八角資源進一步得以綜合利用，可以增加八角種植戶的經(jīng)濟收入。</p><p>　　提取測定方法穩(wěn)定可靠以莽草酸為標準品，測定八角茴香中的莽草酸含量，具有簡便、穩(wěn)定、結果可靠的優(yōu)點［4，5］，對進一步開發(fā)利用八角茴香中莽草酸很有實際價值。</p><p><b>　　【參考文獻】</b><

20、/p><p>　?。?］ 宋小妹，唐志書.中藥化學成分提取分離與制備［M］.北京：人民衛(wèi)生出版社，2004：31.</p><p>　　［2］ 劉永友，廖曉峰.莽草酸的研究進展［J］.化工時刊，2007，21（3）：54.</p><p>　?。?］ 林海祿，彭雪嬌，羅明標，等.八角茴香中莽草酸超聲提取工藝研究［J］.食品科技，2007，4：76.</p>