豬繁殖與呼吸綜合征病毒感染細(xì)胞的差異蛋白組學(xué)研究.pdf

1、2006年5月，在我國的江西省首先發(fā)生了豬“高熱病”，隨后蔓延至全國。該傳染病具有發(fā)病地區(qū)多、流行范圍廣、死亡率極高等特點(diǎn)，致使200多萬頭豬受到感染，40多萬頭豬死亡，給我國養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的損失。該病于7月份在福建省出現(xiàn)，并迅速傳播。我們實(shí)驗(yàn)室收集了來自疑似發(fā)生了“高熱病”的不同豬場病料，進(jìn)行了病毒分離和鑒定，運(yùn)用RT-PCR技術(shù)檢測豬繁殖與呼吸綜合征病毒(porcine reproductive and respiratory s

2、yndrome virus，PRRSV)。 利用雙向電泳技術(shù)對體外培養(yǎng)的豬繁殖與呼吸綜合征病毒071030株和福州株進(jìn)行接種正常Marc-145細(xì)胞產(chǎn)生的蛋白質(zhì)表達(dá)差異，尋找與毒力相關(guān)的蛋白質(zhì)。將071030株和福州株接種正常Marc-145細(xì)胞于37℃、5％CO2的環(huán)境中培養(yǎng)72 h，從細(xì)胞中獲得蛋白。第一向電泳用pH3-10非線性IPG膠條進(jìn)行等電聚焦，第二向電泳用SDS-PAGE凝膠再分離蛋白，經(jīng)過銀染，圖像掃描后，利用軟

3、件分析處理圖像。在正常Marc-145細(xì)胞、接種071030株和福州株的細(xì)胞的蛋白質(zhì)圖譜中分別檢測出188、252、286個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)，它們的蛋白質(zhì)分子質(zhì)量分布基本相似；在所檢測到的差異蛋白質(zhì)點(diǎn)中，其中有12個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)共存在于正常細(xì)胞和接種福州株細(xì)胞中，有2個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)共存在于正常細(xì)胞和接種071030株細(xì)胞中，有1個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)只存在于接種福州株細(xì)胞中，有3個(gè)蛋白質(zhì)點(diǎn)只存在接種071030株細(xì)胞中，而接種071030株和福州株的細(xì)胞共有9個(gè)蛋