葉酸對(duì)母豬繁殖性能、宮內(nèi)發(fā)育遲緩仔豬肝臟基因表達(dá)和蛋白質(zhì)組學(xué)影響研究.pdf

1、宮內(nèi)發(fā)育遲緩顯著影響后代個(gè)體出生后的生長(zhǎng)發(fā)育，本研究應(yīng)用RT-PCR和蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)，考察了葉酸對(duì)母豬繁殖性能和官內(nèi)發(fā)育遲緩仔豬肝臟基因表達(dá)和蛋白質(zhì)組的影響。
　　 試驗(yàn)采用單因子試驗(yàn)設(shè)計(jì)，選擇36頭純種大約克初產(chǎn)母豬，分為3個(gè)處理，每個(gè)處理12個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)1頭母豬。將配種后的母豬隨機(jī)分到基礎(chǔ)日糧組(葉酸含量1.3mg/kg)、基礎(chǔ)日糧+葉酸10mg/kg和基礎(chǔ)日糧組+葉酸含量30mg/kg。試驗(yàn)從母豬配種后開(kāi)始至仔豬斷奶，

2、母豬妊娠第46，60和74d采血，記錄各處理組每頭母豬的繁殖性能指標(biāo)，21d斷奶時(shí)稱量仔豬體重。分娩時(shí)在基礎(chǔ)日糧組和添加葉酸30mg/kg組中分別選取8頭正常體重(NBW，BW＞1.4kg)和宮內(nèi)發(fā)育遲緩(IUGR，0.8＜BW＜0.9kg)仔豬屠宰收集血清和肝臟。用放射免疫分析法測(cè)定血清葉酸濃度，用RT-PCR方法研究甲硫氨酸腺苷轉(zhuǎn)移酶(MAT)、胱硫醚合成酶(CBS)、亞甲基四氫葉酸還原酶(MTHFR)、DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶-1(DN

3、MT-1)、過(guò)氧化物酶體增生物激活受體(PPAR)、糖皮質(zhì)激素受體(GR)、瘦素受體(ob-R)和乙酰輔酶A氧化酶(AOX)基因mRNA水平在肝臟中的表達(dá)差異，熒光標(biāo)記差異電泳(DIGE)結(jié)合質(zhì)譜串聯(lián)質(zhì)譜(MS/MS)技術(shù)獲得處理間蛋白表達(dá)差異圖譜以及目的蛋白鑒定。
　　 試驗(yàn)結(jié)果表明：
　　 1、母豬飼糧中添加葉酸可顯著提高新生仔豬和妊娠不同階段(妊娠46d、60d和74d)母豬血清葉酸含量（P＜0.05），但對(duì)仔豬初

4、生重、產(chǎn)仔數(shù)、產(chǎn)活仔數(shù)、仔豬存活率以及斷奶體重?zé)o顯著影響（P＞0.05）。
　　 2、母豬葉酸營(yíng)養(yǎng)影響新生仔豬肝臟中與一碳單位代謝和氧化應(yīng)激相關(guān)基因的mRNA表達(dá)量。IUGR+C組仔豬MATIA、MAT2A和DNMT-1基因mRNA的相對(duì)表達(dá)量顯著低于IUGR+F組、NBW+C組和NBW+F組，而PPARγ、GR、AOX基因表達(dá)量高于其他各組(P＜0.05)。IUGR組和IUGR+F組CBS及ob-R表達(dá)量低于NBW+C組和NB

5、W+F組(P＜0.05)。各處理間MTHFR和PPARα基因表達(dá)量無(wú)顯著差異（P＞0.05）。
　　 3、母豬飼糧中添加葉酸可顯著上調(diào)宮內(nèi)發(fā)育遲緩仔豬肝臟熱激蛋白90、脂水解酶、亞胺甲基轉(zhuǎn)移酶環(huán)脫氨酶、順烏頭酸酶和琥珀酸脫氫酶表達(dá)量，下調(diào)不均一核糖核蛋白、遍在蛋白綴合酶、胰蛋白酶、肌動(dòng)蛋白和輸出蛋白表達(dá)量(P＜0.05)。
　　 綜上可見(jiàn)，本試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)妊娠母豬日糧添加高劑量葉酸顯著提高母豬和新生仔豬血清葉酸水平，但對(duì)母豬繁