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1、角膜無血管是角膜透明和正常視力的重要保證。雖然角膜新生血管對(duì)角膜損傷修復(fù)起到一定作用,但是長(zhǎng)期慢性的角膜血管新生會(huì)形成角膜翳,破壞角膜正常微環(huán)境,使眼前節(jié)免疫赦免減弱或消失,影響視力健康。尋求有效治療角膜新生血管的藥物具有重大意義,胸腺素β4具有多重生物學(xué)功能,能預(yù)防細(xì)胞凋亡,減少炎癥發(fā)生,有利于血管生成,促進(jìn)角膜痊愈,但其對(duì)角膜新生血管的作用卻一直沒有定論,還尚有爭(zhēng)議。因此,我們?cè)O(shè)計(jì)體外與體內(nèi)的樣本隨機(jī)對(duì)照實(shí)驗(yàn)探究胸腺素β4對(duì)角膜新生
2、血管形成的影響,為胸腺素β4對(duì)角膜新生血管作用的研究提供理論依據(jù)。
體外原代培養(yǎng)兔的臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞,當(dāng)?shù)谌媚氺o脈內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)至連續(xù)的單層狀態(tài),按一定密度傳代至96孔板,分別按0ng/mL,10ng/mL、100ng/mL、1000ng/mL濃度加入胸腺素β4繼續(xù)培養(yǎng),于24h后分別加入cck-8試劑孵育1h,用酶標(biāo)儀檢測(cè)吸光度值,用于測(cè)定細(xì)胞增殖度。
體內(nèi)通過角膜囊袋法建立兔角膜新生血管模型,采用角膜內(nèi)植
3、入瓊脂糖包裹堿性成纖維生長(zhǎng)因子緩釋明膠海綿小粒誘導(dǎo)兔角膜新生血管的形成。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按胸腺素β4的濃度分為0.1μg/μL、1μg/μL、10μg/μL三個(gè)藥物治療組和PBS對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組每天兩次角膜表面應(yīng)用Tβ4滴眼治療,對(duì)照組每天兩次角膜表面滴加PBS,并觀察新生血管生長(zhǎng)情況,計(jì)算抑制率和消退率。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,體外細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)中樣本濃度為100ng/mL和1000ng/mL的胸腺素β4對(duì)兔臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞有顯著性增殖效果;
4、體內(nèi)模型實(shí)驗(yàn)中藥物濃度為1μg/μL的胸腺素β4的抑制率最高,效果最好,10μg/μL的胸腺素β4早期抑制率較1μg/μL的胸腺素β4低,后期則較高。與PBS對(duì)照組相比,三個(gè)濃度的胸腺素β4藥物治療組都對(duì)角膜新生血管的形成有顯著的抑制作用,但0.1μg/μL的胸腺素β4治療組只是抑制了角膜血管生長(zhǎng),而1μg/μL的胸腺素β4治療組和10μg/μL的胸腺素β4治療組既抑制了角膜新生血管的生長(zhǎng),又顯著地促進(jìn)了角膜新生血管的退化。
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