凝血酶對兔缺血后肢血管新生的影響.pdf

1、目的： 1．觀察經(jīng)肌肉局部注射凝血酶對兔缺血后肢血管新生的影響； 2．初步探討凝血酶誘導缺血組織血管新生的可能機制。 方法： 選用成年健康新西蘭兔40只，采用切除左側后肢股動脈并結扎其主要分支的方法建立兔后肢缺血模型，于造模后隨機分為生理鹽水對照組（NS組）和凝血酶組（THR組），NS組經(jīng)缺血后肢肌肉注射生理鹽水2ml，THR組經(jīng)缺血后肢肌肉注射凝血酶溶液2ml（濃度500IU/ml）。每組動物再設立3天

2、、7天、14天和21天4個觀察時間點（n=5）。實驗動物于各時間點行血管造影，觀察缺血后肢側枝血管形成情況；取實驗動物內收肌肌肉組織標本制作病理切片，行HE染色觀察肌纖維變化和計算微血管密度（MVD），并用免疫組化方法檢測VEGF陽性表達情況，以彩色圖像分析系統(tǒng)測定VEGF表達的積分光密度（IOD）。實驗結果應用統(tǒng)計軟件包SPSS13．0處理。 結果： 1．大體觀察：兩組動物在實驗中無意外死亡。兩組動物左側后肢均出現(xiàn)典型

3、缺血表現(xiàn)：跛行、肌肉萎縮、肢體脫毛，未發(fā)現(xiàn)皮膚潰瘍及壞死。 2．血管造影：造模后3天時左側股動脈主干及其分支血管未見顯影，大腿中段形成少量的側枝血管，7天時側枝血管稍有增多，14天時側枝血管明顯增多，21天時側枝血管進一步增加。兩組在對應的各時間點側枝血管計數(shù)比較無統(tǒng)計學差異（P<0．05）。 3．HE染色：兩組的組織切片中均可見肌纖維萎縮變形、間隙增寬。肌纖維間有一定數(shù)量的毛細血管分布。兩組的微血管密度MVD值于造模后

4、3天開始增高，7天時達高峰，后逐漸降低。THR組在對應的各時間點微血管密度MVD值均高于NS組，兩者比較有統(tǒng)計學差異（P<0．05）。 4．免疫組織化學染色：兩組的組織切片中均可見VEGF陽性表達的血管內皮細胞，VEGF表達的IOD值于造模后3天開始增高，7天時達峰值，后逐漸降低。THR組在對應的各時間點VEGF表達的IOD值均高于NS組，兩者比較有統(tǒng)計學意義（P<0．05）。 5．相關性分析：兩組VEGF表達的IOD值