生物有機(jī)肥防控土傳番茄青枯病的效果及其機(jī)制研究.pdf

1、番茄青枯病是由青枯菌Ralstonia solanacearum引起的一種毀滅性土傳細(xì)菌病害，嚴(yán)重制約著番茄產(chǎn)業(yè)的發(fā)展和經(jīng)濟(jì)效益的提高。生物防治因?qū)Νh(huán)境、生態(tài)和人類(lèi)健康安全而受到了國(guó)內(nèi)外的關(guān)注，并在防治土傳病害中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用。利用有益微生物防治青枯病已有大量的報(bào)道，但總體還處在生防菌資源收集階段，缺乏穩(wěn)定有效的生防產(chǎn)品。本研究從健康番茄植株根際分離獲得解淀粉芽孢桿菌Bacillusamyloliquefaciens QL-18

2、和皮氏勞爾氏菌Ralstonia pickettii QL-A6，分別研制出抗番茄青枯病的生物有機(jī)肥和液體菌劑。通過(guò)溫室盆栽和田間試驗(yàn)研究了生物有機(jī)肥和液體菌劑單獨(dú)或復(fù)合施用控制番茄青枯病的效果，并探討了兩者的作用機(jī)理。主要結(jié)果如下:
　　 1、調(diào)查了南京麒麟鎮(zhèn)后村蔬菜種植區(qū)番茄青枯病的現(xiàn)狀，結(jié)果表明:春季發(fā)病率一般低于秋季，前茬為寄主作物的田塊發(fā)病率高于前茬為非寄主作物的田塊。灌溉水源中沒(méi)有檢測(cè)到致病菌，但在灌溉溝渠中檢測(cè)到致

3、病菌。利用選擇性培養(yǎng)基M-SMSA從番茄植株根際分離獲得流動(dòng)型（疑似致病力青枯菌）和非流動(dòng)型菌株（疑似無(wú)致病力青枯菌），根據(jù)形態(tài)特征、生理生化、特異性基因片段擴(kuò)增、16S rRNA基因序列、致病性鑒定等手段，最終確定流動(dòng)型菌株為強(qiáng)致病力R.solanacearum（其中一株命名為QL-Rs1115）;非流動(dòng)型菌株為R.pickettii（其中一株命名為QL-A6）和R.mannitolilytica。
　　 2、從健康番茄植株根

4、際分離到37株對(duì)青枯菌QL-Rs1115有抑制能力的細(xì)菌，其中B.amyloliquefaciens QL-18對(duì)青枯菌的平板抑制作用最強(qiáng)，在健康土壤（水稻土）和帶病土壤（番茄連作土）中均顯著抑制了青枯病發(fā)病率，減少了青枯菌在番茄植株根際和莖基部的數(shù)量。生防菌QL-18具有合成Fengycin、Subtilisin和Iturin等抗生素的能力，在PDA平板上能抑制Rhizoctonia solani，Phytophthora capsi

5、ci，P.nicotianae，F(xiàn)usarium oxysporum f.sp.niveum,F.oxysporum f.sp.cucumuerimu,F.oxysporum f.sp.melonis和Verticillium dahliae Kleb等植物土傳病原真菌。GFP標(biāo)記研究發(fā)現(xiàn)生防菌QL-18在番茄植株根表具有較好的定殖能力。
　　 3、以菜粕堆肥(RCC)、豬糞堆肥(PMC)、菜粕和豬糞堆肥1∶1混合物（R&P）、

6、雞糞堆肥(CMC)、牛糞堆肥(CDC)和中藥渣堆肥(HRC)和2種泥炭（高位泥炭MP和低位泥炭FP）為原料，篩選適合生防菌QL-18的營(yíng)養(yǎng)載體。結(jié)果表明，RCC不但能為生防菌QL-18提供大量的可溶性C、N養(yǎng)分，使其在載體中更好的繁殖和存活;而且能抑制青枯菌QL-Rs1115的生長(zhǎng)，是菌株QL-18的最佳營(yíng)養(yǎng)載體。在FP中生防菌QL-18也能保持很高的數(shù)量，但與其它堆肥載體相比，F(xiàn)P延長(zhǎng)了青枯菌QL-Rs1115的存活時(shí)間，因此不是最適

7、的生防菌營(yíng)養(yǎng)載體。
　　 4、將生防菌QL-18與菜粕堆肥二次固體發(fā)酵制成生物有機(jī)肥BOF。盆栽試驗(yàn)中，在育苗穴盤(pán)和移栽盆缽中均施用BOF的處理，番茄植株根際青枯菌的數(shù)量顯著減少，有效降低了青枯病發(fā)病率。田間條件下BOF的控病效果園季節(jié)不同而異，春季施用BOF防效比秋季好，且育苗和移栽時(shí)均施用BOF的處理防效高于單施處理。番茄植株青枯病發(fā)病率與土壤中初始青枯菌的含量呈顯著正相關(guān)，土壤初始病原菌數(shù)量越高，BOF的防病效果越差。

8、r>　　 5、盆栽試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)R.pickettii QL-A6在番茄根際和莖部定殖數(shù)量達(dá)到107 cfu/gdw和108 cfu/g fps，具備和青枯菌競(jìng)爭(zhēng)的能力。灌根法施用R.pickettii QL-A6，能顯著降低根際病原菌數(shù)量，有效防控苗期番茄青枯病的發(fā)生;增加R.pickettii QL-A6的施用量，能顯著提高其生防效率。莖部注射法施用R.pickettii QL-A6的防控效果顯著高于灌根法，R.pickettii

9、QL-A6在地上部各組織大量定殖，抑制了病原菌對(duì)番茄的侵染。田間試驗(yàn)結(jié)果表明，莖部注射法施用R.pickettii QL-A6能有效降低番茄青枯病的發(fā)病率。
　　 6、溫室和田間試驗(yàn)結(jié)果表明，育苗施用BOF和莖部注射施用R.pickettii QL-A6兩種方法配施能穩(wěn)定防控番茄青枯病(70％～86％)。田間單獨(dú)施用BOF或R.pickettiiQL-A6的防效均受季節(jié)影響:BOF處理的春季防效好(54.7％)，秋季防效差(30