菌株N5對(duì)番茄的促生及其防控番茄青枯病的作用.pdf

1、番茄青枯病又稱細(xì)菌性枯萎病(bacterialwilt)，是由青枯雷爾氏菌(Raslotniaosolanacearum)引起的一種毀滅性土傳病害，是番茄生長(zhǎng)過(guò)程中發(fā)生的重要病害之一，在我國(guó)番茄種植區(qū)發(fā)病日趨嚴(yán)重，尤其在連作條件下。對(duì)該病害的防治主要是采用培育抗病品種、實(shí)行輪作和噴灑農(nóng)藥等農(nóng)業(yè)措施，但受到各種條件的限制，防治效果很不理想。采用生物防治來(lái)防治番茄青枯病是目前的研究熱點(diǎn)和發(fā)展方向。
　　本文以采自江西鷹潭的土樣為材料，

2、篩選了一株具有高效拮抗番茄青枯病病原菌的細(xì)菌，并以此研制出一種抗番茄青枯病的專用生物有機(jī)肥，利用盆栽試驗(yàn)研究了其生防效果與機(jī)理，主要結(jié)果如下:
　　1.經(jīng)過(guò)初篩、復(fù)篩獲得了高效拮抗菌株N5。通過(guò)形態(tài)特征觀察、常規(guī)生理生化鑒定及16SrRNA基因序列對(duì)比，該菌株為甲基營(yíng)養(yǎng)型芽孢桿菌(Bacillusmethylotrophicus)。菌株N5抑菌譜較廣，可以對(duì)多種病原真菌產(chǎn)生拮抗作用，如對(duì)棉花大麗輪枝菌(Verticilliumda

3、hliaeKleb)，油菜核盤菌(Sclerotiniasclerotiorum(Lib.)deBary)，香蕉尖孢鐮刀菌(Fusariumoxysporumf.sp.cubense)，甜瓜尖孢鐮刀菌(Fusariumoxysporumf.sp.melonis)，黃瓜尖孢鐮刀菌(Fusariumoxysporumf.sp.cucumerinum)，水稻紋枯病(Rhizoctoniasolanb。通過(guò)對(duì)菌株N5發(fā)酵液的抑菌物質(zhì)穩(wěn)定性初步研

4、究發(fā)現(xiàn):抑菌物質(zhì)對(duì)胰白酶不敏感，對(duì)堿不敏感，而對(duì)紫外線照射和溫度比較敏感。菌懸液(108cfu·mL-1)處理的種子萌發(fā)率提高了6.8％，說(shuō)明N5菌株對(duì)種子萌發(fā)有促進(jìn)作用。
　　2.盆栽試驗(yàn)研究了營(yíng)養(yǎng)缽育苗和盆栽時(shí)分別使用化肥、普通有機(jī)肥和生物有機(jī)肥對(duì)番茄植株生長(zhǎng)的影響，設(shè)置了6個(gè)處理:(1)CC(CK+CK)，即營(yíng)養(yǎng)缽育苗與大盆均施用化肥;(2)CB(CK+BIO)，營(yíng)養(yǎng)缽施用化肥，大盆施生物有機(jī)肥;(3)OO(OF+OF)，營(yíng)

5、養(yǎng)缽與大盆均施用有機(jī)肥;(4)OB(OF+BIO)，營(yíng)養(yǎng)缽施用有機(jī)肥，大盆施用生物有機(jī)肥;(5)BC(BIO+CK)，營(yíng)養(yǎng)缽施用生物有機(jī)肥，大盆施用化肥;(6)BB(BIO+BIO)，營(yíng)養(yǎng)缽與大盆均施用生物有機(jī)肥。結(jié)果表明生物有機(jī)肥對(duì)番茄植株具有較好的促生作用，能促進(jìn)植株和根系生長(zhǎng)，增強(qiáng)根系活力。與施用化肥和普通有機(jī)肥相比，營(yíng)養(yǎng)缽與大盆都施用生物有機(jī)肥(BB)的番茄植株鮮重增加2.27和1.14倍，根系活力比化肥(CC)與有機(jī)肥處理(O

6、O)分別增加了2.21和1.76倍，其他處理(CB、OB、BC)也均與化肥形成顯著性差異。生物有機(jī)肥的促生機(jī)理可能與N5菌株具有產(chǎn)鐵載體、吲哚乙酸等促生物質(zhì)有關(guān)。
　　3.生防試驗(yàn)的處理設(shè)置和促生試驗(yàn)相同，結(jié)果表明施用生物有機(jī)肥能夠有效防控番茄青枯病，有效改善番茄根際土壤微生物區(qū)系。營(yíng)養(yǎng)缽與大盆都施用生物有機(jī)肥(BB)能有效抑制病原菌的增長(zhǎng)，降低番茄青枯病的發(fā)病指數(shù)，防治率達(dá)到69％。施用生物有機(jī)肥的番茄根際的細(xì)菌數(shù)量和放線菌數(shù)量

7、顯著高于化肥處理(CC)。PCR-DGGE分析顯示，營(yíng)養(yǎng)缽和盆栽均施用生物有機(jī)肥(BB)可以顯著增加根際土壤中細(xì)菌的多樣性，降低真菌數(shù)量和多樣性。
　　4.發(fā)酵液經(jīng)硫酸銨沉淀、透析后的拮抗蛋白對(duì)番茄青枯病菌有拮抗效果，其中有效抑菌活性蛋白主要集中在30～50％的硫酸銨沉淀中。從發(fā)酵液中提取了脂肽類粗提物，此粗提物對(duì)茄科勞爾氏菌具有抑制作用。PCR擴(kuò)增出9種脂肽類物質(zhì)合成的基因片段，顯示N5具有產(chǎn)4種脂肽活性物質(zhì)的能力。HPLC-M