果蠅泛素特異性蛋白酶基因CG4166的敲除及功能分析.pdf

1、泛素-蛋白酶體途徑(ubiquitin-proteasome pathway)是細(xì)胞內(nèi)一個(gè)十分重要的蛋白質(zhì)降解系統(tǒng)。它主要是通過(guò)對(duì)多聚泛素化的底物蛋白進(jìn)行降解從而影響很多的生物過(guò)程如基因的轉(zhuǎn)錄、細(xì)胞周期的調(diào)節(jié)、免疫反應(yīng)、腫瘤生長(zhǎng)、炎癥等過(guò)程。其中去泛素化酶(deubiquitinating enzymes，DUBs)的功能將泛素或多聚泛素鏈從底物蛋白水解下來(lái)，去泛素酶參與了很多重要的生理活動(dòng)，目前已經(jīng)有很多的報(bào)道證明了很多的USP在體內(nèi)

2、發(fā)揮重要的作用，如癌癥發(fā)生、腫瘤的侵襲以及細(xì)胞生長(zhǎng)發(fā)育等。
　　由于去泛素酶在進(jìn)化過(guò)程中是十分保守的，因此可以利用果蠅作為模式生物來(lái)研究去泛素基因的功能。利用已經(jīng)建立的RNAi果蠅庫(kù)和UAS-Gla4表達(dá)系統(tǒng)對(duì)去泛素基因進(jìn)行篩選，然后確定基因CG4166進(jìn)行進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)。當(dāng)通過(guò)RNAi將基因CG4166沉默后，我們發(fā)現(xiàn)果蠅的翅膀出現(xiàn)剛毛部分丟失，眼睛比正常果蠅眼睛大。然后利用P因子技術(shù)進(jìn)行基因的敲除，敲除后得到突變體并對(duì)突變體果蠅