移植血培養(yǎng)內(nèi)皮祖細(xì)胞改善腦損傷小鼠神經(jīng)功能的研究.pdf

1、分類號(hào)：116511密級(jí)：學(xué)位類別：科學(xué)學(xué)位團(tuán)專業(yè)學(xué)位口博士學(xué)位論文DOCToRALDISSERTATION學(xué)校代碼：10062學(xué)號(hào)：2010601071學(xué)：科門類：醫(yī)學(xué)又蚌醬科鼻普TlANJlN黼EOleALUNlVERSl科論文題目t移植血培養(yǎng)內(nèi)皮祖細(xì)胞改善腦損傷小鼠神經(jīng)功能的研究TITLETranspIantationofexpandedendotheIiaICOIonyformingceIISimprovedtheoutcome

2、oftraumatiCbraininjuryinamousemodeI一級(jí)學(xué)科：臨床醫(yī)學(xué)二級(jí)學(xué)科：外科學(xué)神經(jīng)外論文作者：張永強(qiáng)指導(dǎo)教師：張建寧教授天津醫(yī)科大學(xué)研究生院二。一三年五月天津醫(yī)科大學(xué)博士學(xué)位論文中文摘要背景顱腦創(chuàng)傷對(duì)于人體健康危害極大，是現(xiàn)代社會(huì)致死率及致殘率極高的疾病之一，尤其是對(duì)于年齡小于45歲的中青年人群。創(chuàng)傷后的一系列復(fù)雜病理生理學(xué)變化導(dǎo)致微循環(huán)障礙，血腦屏障通透性增高，神經(jīng)元死亡，以及神經(jīng)功能障礙。對(duì)于腦創(chuàng)傷的研究注

3、重于傷后腦血流、腦代謝、腦水腫、顱高壓、電解質(zhì)平衡以及腦組織形態(tài)學(xué)改變的研究。盡管對(duì)于顱腦創(chuàng)傷后的病理生理學(xué)機(jī)制的研究有了很大發(fā)展，但是對(duì)于顱腦創(chuàng)傷的治療方法還是較為局限，主要基于傷后的對(duì)癥支持治療。越來(lái)越多的學(xué)者意識(shí)到促進(jìn)腦創(chuàng)傷區(qū)域血循環(huán)的恢復(fù)，對(duì)于大腦神經(jīng)功能的恢復(fù)起到至關(guān)重要的作用。已有研究表明內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelialprogenitorcells，EPCs)nJ“以促進(jìn)血管新生，并己在多種體內(nèi)研究中證實(shí)具有血管生成及促

4、進(jìn)損傷恢復(fù)的作用。血培養(yǎng)內(nèi)皮祖細(xì)胞又稱為內(nèi)皮集落形成細(xì)胞(Endothelialcolonyformingcells，ECFCs)是EPCs的同源亞型，具有更強(qiáng)的細(xì)胞增殖潛能并且表達(dá)更多的血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體。ECFCs移植治療是當(dāng)前研究的熱點(diǎn)。目的：在顱腦創(chuàng)傷小鼠模型中證實(shí)循環(huán)血中內(nèi)皮祖細(xì)胞在創(chuàng)傷急性期可以歸巢定位于腦創(chuàng)傷區(qū)域，并探索移植血培養(yǎng)內(nèi)皮祖細(xì)胞對(duì)創(chuàng)傷后神經(jīng)功能的影響，為臨床治療顱腦創(chuàng)傷提供新的治療策略。方法：應(yīng)用梯度離心法分

5、離新鮮臍靜脈血提取單個(gè)核細(xì)胞(MNCs)，將所獲得的MNCs采用貼壁培養(yǎng)的方法獲取血培養(yǎng)EPCs(ECFCs)集落，并在體外培養(yǎng)、擴(kuò)增，采用細(xì)胞免疫熒光法檢測(cè)所獲ECFCs的細(xì)胞表面標(biāo)記。應(yīng)用液壓打擊設(shè)備制備顱腦損傷免疫缺陷小鼠模型并將其隨機(jī)分為三組，包括ECFCs移植組，PBS注射組和單純打擊組，將培養(yǎng)ECFCs由尾靜脈注射入小鼠體內(nèi)。應(yīng)用性別錯(cuò)配實(shí)驗(yàn)，即將所獲來(lái)源于男性胎兒臍帶血的ECFCs由尾靜脈移植入創(chuàng)傷后雌性小鼠體內(nèi)，采用人Y