骨髓間充質(zhì)干細胞對腎癌裸鼠皮下移植瘤的影響.pdf

1、廈門大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下，獨立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當方式明確標明，并符合法律規(guī)范和《廈門大學(xué)研究生學(xué)術(shù)活動規(guī)范(試行)》。另外，該學(xué)位論文為()課題(組)的研究成果，獲得()課題(組)經(jīng)費或?qū)嶒炇业馁Y助，在()實驗室完成。(請在以上括號內(nèi)填寫課題或課題組負責(zé)人或?qū)嶒炇颐Q，未有此項聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。)聲明人(簽名)：嬲k體年與

2、月勿日摘要摘要目的：研究骨髓間充質(zhì)干細胞(mesenchymalstemcells，MSC)對A498腎癌裸鼠移植瘤的影響。方法：培養(yǎng)腎癌A498細胞和人MSC，用CMDil標記MSC并對標記后MSC細胞的活性和增殖能力進行比較，構(gòu)建A498腎癌裸鼠皮下移植瘤模型，實驗裸鼠共36只，當裸鼠移植瘤長徑達05～08cm，將其隨機分為2組：一組注射CM—Dil標記的MSC(MSC組)，另一組注射生理鹽水(NS對照組)，其中，每組各有6只j于觀

3、察生存期。從接種腫瘤的第1天起，隔天觀察裸鼠飲食、排便、活動狀況以及腫瘤的生長情況；在注射MSC之后的不同時間段(3天，6天，15天，30天)用游標卡尺測量裸鼠皮下移植瘤的長徑、短徑，并計算皮下移植瘤體積，記錄注射當天開始至裸鼠死亡的時間，計算各組裸鼠平均生存時間，比較兩組裸鼠生存時間差異。分別在MSC注射接種后的3天，6天，15天，30天，將MSC組和NS對照組裸鼠各處死3只，留取MSC組皮下移植瘤組織冰凍切片，在熒光顯微鏡下，觀察C

4、M—Dil標記的MSC在不同的時間點裸鼠腫瘤組織中的分布情況；蘇木素一伊紅(hematoxylin—esosin，HE)染色后行HE染色病理學(xué)觀察。取各組小鼠上述時間點的腫瘤組織切片，用RTPCR和WesternBlot分別檢測Twist基因和蛋白的表達情況。結(jié)果：CMDil標記的MSC活性和增殖與未標記的MSC無明顯改變；MSC組裸鼠皮下移植痛在注射后15天內(nèi)增長緩慢，與NS對照組比較有顯著差異(P005)：MSC組裸鼠的生存期延長；

5、熒光冰凍切片追蹤裸鼠腫瘤組織中CM—Dil標記的MSC，熒光顯微鏡下觀測到CMDil標記的MSC在綠色熒光激發(fā)下，細胞膜呈明亮的橙紅色，細胞質(zhì)與細胞核呈類圓形暗區(qū)，隨著時間的推移，熒光亮度逐漸變?nèi)?，熒光范圍也逐漸縮??；HE染色結(jié)果顯示MSC組炎癥反應(yīng)較NS對照輕；Twist基因以及Twist蛋白在MSC組的表達明顯比NS組少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(氏005)。結(jié)論：骨髓問充質(zhì)干細胞移植顯著抑制A498腎癌裸鼠移植瘤的生長，并延遲受體裸鼠的生