針刺結(jié)合運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)腦梗死大鼠學(xué)習(xí)記憶功能和患側(cè)海馬CA3區(qū)Map-2、P38表達(dá)的影響.pdf

1、目的:通過(guò)觀察針刺結(jié)合運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能、學(xué)習(xí)記憶能力、微管相關(guān)蛋白(MAP-2)、突觸素(P38)表達(dá)變化的影響，探討針刺結(jié)合運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)腦梗死大鼠學(xué)習(xí)記憶能力、中樞神經(jīng)系統(tǒng)樹突和突觸的可塑性影響及其可能機(jī)制。 方法:(1)參照小泉線栓法建立Wistar大鼠右側(cè)大腦中動(dòng)脈腦梗死(MCAO)模型。 (2)將80只WistarMCAO大鼠隨機(jī)分成4組:假手術(shù)組8例，模型組24例，運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組24例，針刺運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組24例。模型組、運(yùn)

2、動(dòng)訓(xùn)練組和針刺運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組每組各分三個(gè)時(shí)段進(jìn)行觀察，分別為手術(shù)后1周、3周、5周，每時(shí)段各為8只。(3)動(dòng)物清醒后進(jìn)行模型成功評(píng)價(jià)。均單獨(dú)小鼠籠飼養(yǎng)，運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組大鼠于手術(shù)后第五天開始每天進(jìn)行滾筒式網(wǎng)狀訓(xùn)練、轉(zhuǎn)棒訓(xùn)練、平衡棒訓(xùn)練及網(wǎng)屏訓(xùn)練。針刺運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組大鼠除運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練外(同運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組)于模型成功評(píng)價(jià)后進(jìn)行頭穴針刺治療。(4)假手術(shù)組于手術(shù)前后分別進(jìn)行1次神經(jīng)功能和運(yùn)動(dòng)能力測(cè)評(píng)，模型組、運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組和針刺運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組在術(shù)后各時(shí)段進(jìn)行神經(jīng)功能及運(yùn)動(dòng)

3、功能評(píng)分，在術(shù)后5周進(jìn)行學(xué)習(xí)記憶能力測(cè)評(píng)。觀察針刺與運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)MCAO大鼠行為學(xué)和學(xué)習(xí)記憶功能恢復(fù)的影響。 (5)用MAP-2免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)試劑盒，SABC法色各組腦梗死患側(cè)海馬CA3區(qū)的MAP-2表達(dá)變化特點(diǎn)，探討針刺與運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)樹突可塑性的影響。 (6)用P38免疫組織化學(xué)實(shí)驗(yàn)試劑盒，SABC法顯色各組腦梗死患側(cè)海馬CA3區(qū)的P38表達(dá)變化特點(diǎn)，探討針刺與運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)突觸可塑性的影響。(7)用圖像分析技術(shù)對(duì)各組免疫組化實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行定

4、位、定性、定量統(tǒng)計(jì)。(8)用SPSS11.5 for windows對(duì)統(tǒng)計(jì)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)果:(1)假手術(shù)組術(shù)后的神經(jīng)功能和運(yùn)動(dòng)能力評(píng)分與手術(shù)前無(wú)差異。模型組、運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組和針刺運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組術(shù)后神經(jīng)功能和運(yùn)動(dòng)功能較手術(shù)前和假手術(shù)組均出現(xiàn)明顯變化。針刺運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組神經(jīng)功能評(píng)分優(yōu)于模型組和運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組，與模型組比較在術(shù)后1周時(shí)差異有極顯著性(P<0.01)，術(shù)后3周、5周時(shí)差異有顯著性(P<0.05)；與運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組比較術(shù)后1周、3周

5、比較差異有顯著性(P<0.05)，術(shù)后5周時(shí)比較無(wú)顯著性差異。針刺運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組運(yùn)動(dòng)能力評(píng)分優(yōu)于模型組和運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組，與模型組比較在術(shù)后1周、3周時(shí)差異有極顯著性(P<0.01)，術(shù)后5周時(shí)平衡木步行和網(wǎng)屏實(shí)驗(yàn)比較差異有顯著性(P<0.05)，而轉(zhuǎn)棒步行訓(xùn)練差異仍有極顯著性(P<0.01)；與運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組比較在術(shù)后1周、差異有顯著性(P<0.05)，術(shù)后3周時(shí)轉(zhuǎn)棒步行訓(xùn)練差異有顯著性(P<0.05)，其余比較無(wú)顯著性差異。(2)相應(yīng)認(rèn)知功能檢測(cè)

6、針刺運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組Y-型迷宮分辨學(xué)習(xí)能力優(yōu)于運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組，差異有顯著性(P<0.05)；和模型組比較，差異有極顯著性(P<0.01)。(3)假手術(shù)組MAP-2陽(yáng)性纖維排列整齊，分布密集。梗死后梗死灶中心區(qū)無(wú)MAP-2陽(yáng)性染色，邊緣區(qū)僅見少量陽(yáng)性短樹突纖維。患側(cè)海馬CA3區(qū)陽(yáng)性神經(jīng)元及樹突纖維減少，光密度值于術(shù)后l周最低，后逐漸增高，至術(shù)后5周時(shí)仍低于正常對(duì)照組。術(shù)后1周模型組、運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組MAP-2陽(yáng)性纖維明顯減少，針刺運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組MAP-2陽(yáng)性

7、纖維稍有增多，和模型組、運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組比較差異均有極顯著性(P<0.01):在術(shù)后3周、5周時(shí)MAP-2陽(yáng)性表達(dá)較模型組明顯增多，與運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組比較差異有顯著性(P<0.05)，和模型組比較差異有極顯著性(P<0.01)。(4)假手術(shù)對(duì)照組海馬CA3區(qū)可見突觸素免疫陽(yáng)性產(chǎn)物呈點(diǎn)狀、小團(tuán)塊狀彌漫分布，突觸素陽(yáng)性物在神經(jīng)細(xì)胞表面排列成環(huán)狀或半弧形，胞漿中僅有較弱的反應(yīng)，在神經(jīng)纖維間排列呈大小不一、不規(guī)則團(tuán)塊狀，少數(shù)沿神經(jīng)纖維兩側(cè)排列呈線狀。梗死后

8、梗死灶中心區(qū)無(wú)明顯陽(yáng)性染色，患側(cè)海馬CA3區(qū)突觸素染色陽(yáng)性纖維從缺血第7天開始逐漸增多。針刺運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組在術(shù)后1周P38光密度稍有增強(qiáng)，和模型組、運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組比較差異均有顯著性(P<0.01)；在術(shù)后3周P38光密度明顯增強(qiáng)，與運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組比較差異有顯著性(P<0.05)，和模型組比較差異有極顯著性(P<0.01)。在術(shù)后5周在術(shù)后與運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練組比較差異無(wú)顯著性，和模型組比較差異有顯著性(P<0.05)。 結(jié)論:(1)腦缺血損傷后患側(cè)海