兩株生防細(xì)菌對(duì)蔬菜枯萎病的防治效果及其抗菌物質(zhì)的研究.pdf

1、蔬菜是關(guān)系人類健康狀況的重要食物之一，蔬菜病害的生物防治是提高蔬菜產(chǎn)量和品質(zhì)的有效途徑。本研究采用室內(nèi)平板對(duì)峙培養(yǎng)和盆栽試驗(yàn)相結(jié)合的方法，研究多粘類芽孢桿菌 BRF-1和枯草芽孢桿菌BRF-2對(duì)黃瓜和番茄枯萎病的防治效果；應(yīng)用硫酸銨分級(jí)沉淀和有機(jī)溶劑固體浸提等方法分別對(duì)兩株生防菌的抗菌物質(zhì)進(jìn)行分離提?。徊捎肞CR-DGGE分子生物學(xué)方法，研究不同采樣時(shí)期兩株生防菌對(duì)兩種蔬菜根際微生物群落結(jié)構(gòu)的影響。 試驗(yàn)結(jié)果表明，兩株生防細(xì)菌不

2、同稀釋倍數(shù)的代謝產(chǎn)物對(duì)3種蔬菜病害病原真菌分生孢子萌發(fā)和4種病原菌菌絲生長(zhǎng)均具有抑制作用。當(dāng)兩菌株代謝產(chǎn)物稀釋5倍時(shí)，對(duì)分生孢子萌發(fā)的抑制率達(dá)到80％以上；兩菌株代謝產(chǎn)物在稀釋2倍和5倍時(shí)，對(duì)4種病原真菌菌絲生長(zhǎng)的抑制率在40％～80％之間，與對(duì)照相比差異極顯著(P<0.01)。盆栽試驗(yàn)表明，BRF-1和BRF-2生防細(xì)菌菌懸液及其無菌代謝產(chǎn)物對(duì)黃瓜和番茄枯萎病不僅具有較好的防治效果，而且具有明顯的促進(jìn)生長(zhǎng)作用。 通過硫酸銨分級(jí)

3、沉淀、Sephadex G-50柱層析并采用抑菌活性和SDS-PAGE跟蹤檢測(cè)，從多粘類芽孢桿菌BRF-1菌株代謝產(chǎn)物中分離純化到一種對(duì)大豆立枯絲核菌具有拮抗活性的抗菌蛋白，分子量約35.4 kDa。用乙醇、甲醇有機(jī)溶劑和水對(duì)BRF-2代謝產(chǎn)物進(jìn)行固體浸提，抑菌圈半徑分別為17.0 mm，13.5 mm，9.5 mm，其中乙醇提取的活性物質(zhì)通過氣相色譜質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)行初步鑒定，結(jié)果表明拮抗活性物質(zhì)的主要成分為含有羧基的酯類物質(zhì)。

4、采用PCR—DGGE技術(shù)，研究接種生防菌BFR-1和BRF-2對(duì)黃瓜和番茄不同時(shí)期根際土壤微生物群落結(jié)構(gòu)的影響。結(jié)果表明，兩株生防菌對(duì)兩種蔬菜根際細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)影響不明顯，作物種類和取樣時(shí)期是決定根際細(xì)菌群落結(jié)構(gòu)變化的主導(dǎo)因素，生防菌的作用處于次要地位。而對(duì)兩種蔬菜根際真菌群落結(jié)構(gòu)的研究表明，番茄根際真菌群落結(jié)構(gòu)受生防菌處理的影響較采樣時(shí)期的影響大，黃瓜根際真菌群落結(jié)構(gòu)受處理和時(shí)期影響都不明顯。因此，真菌群落結(jié)構(gòu)受生防菌影響的大小因作物種