中草藥F對番茄枯萎病的抗菌活性研究.pdf

1、本文以番茄枯萎病菌為供試菌種，以中草藥F為研究對象，通過液—液分配、柱層析等方法從中草藥F中分離得到主要抑菌活性成分2006-HS，主要研究結(jié)果如下： 1.以95％乙醇為提取溶劑，采用冷浸法提取。離體實驗表明粗提物對番茄枯萎病菌具有較強活性。粗提物對番茄枯萎病菌3d和4d的毒力回歸方程分別為y3=0.8516x+3.8502(r=0.9697)和y4=0.7103x+4.0667(r=0.9557)，計算出3d和4d的EC50分

2、別為0.224g/L和0.206g/L。 2.石油醚/70％乙醇(V：V=1：3)對粗提物進行液—液分配分離，石油醚去除了部分色素和雜質(zhì)，水相將粗提物中極性大的物質(zhì)分離出來，所得的油狀物中活性物質(zhì)含量提高，對番茄枯萎病菌的抑制作用增強。油狀物相對番茄枯萎病菌離體試驗3d和4d的毒力回歸方程為y3=1.0274x+3.7194(r=0.9766)和y4=1.0082x+3.7751(r=0.9879)，對番茄枯萎病菌的3d和4d的

3、EC50分別為0.176g/L和0.164g/L，與粗提物相比，3d的EC50值下降了21.4％，4d的EC50值下降了20.3％，抑菌活性顯著提高。 3.采用硅膠柱，洗脫液為石油醚和乙酸乙酯，兩次柱層析，得到了晶體。二次柱層析后的晶體對番茄枯萎病菌3d和4d的毒力回歸方程為y3=0.8843x+4.5025(r=0.9481)和y4=0.9357x+4.3982(r=0.9647)；5d毒力回歸方程為y5=0.9651x+4.

4、3309(r=0.9612)。晶體對番茄枯萎病菌的3d、4d和5d的EC50分別為0.037g/L、0.044g/L和0.049g/L，隨時間的延長，活性有所下降，EC50值略有增大。與粗提物相比，3d的EC50值下降了79.0％，4d的EC50值下降了73.2％。 4.晶體物質(zhì)經(jīng)高效薄層板“П”形二維三次平面展開，在365nm紫外燈下快速觀察，始終出現(xiàn)一個斑點，定名為2006-HS。晶體物質(zhì)在高效液相色譜檢測圖譜中，只出現(xiàn)了單

5、一的色譜峰，且對稱性很好，其保留時間T=8.601min。 5.活性物質(zhì)2006-HS的熱分析結(jié)果表明熔點為84.1℃。通過元素分析儀測定出活性物質(zhì)2006-HS中含有C、H和O，三種元素的百分含量分別為74.25％、6.90％和18.85％。結(jié)合質(zhì)譜，計算出活性物質(zhì)2006-HS的分子量為244.28，推斷出活性物質(zhì)的分子式：C15H16O3。 6.紅外光譜分析說明活性物質(zhì)2006-HS的分子結(jié)構式中含有C=0基、苯環(huán)