利妥昔單抗影響彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者Th17細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子的研究.pdf

1、研究背景:Th17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子在腫瘤中的作用越來(lái)越引起國(guó)內(nèi)外學(xué)者的重視,但是Th17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子究竟起抗腫瘤還是促腫瘤作用,目前尚存在爭(zhēng)議。RCHOP方案(美羅華、環(huán)磷酰胺、柔紅霉素、長(zhǎng)春新堿、潑尼松方案)是治療彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤(DLBCL)的一線(xiàn)治療方案,利妥昔單抗(rituximab)在治療中起到重要作用,國(guó)外已有文獻(xiàn)報(bào)道利妥昔單抗對(duì)RA患者Th17細(xì)胞有影響,本研究通過(guò)體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn)探討利妥昔單抗對(duì)彌漫大B細(xì)胞淋

2、巴瘤患者Th17細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子的影響及其意義。
　　目的:探討利妥昔單抗對(duì)彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者Th17細(xì)胞及相關(guān)細(xì)胞因子體內(nèi)及體外的影響及其意義。
　　方法:①、體內(nèi)實(shí)驗(yàn):彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤初治患者50例,按化療方案不同分為化療后RCHOP組28例(CR24例,非CR4例)和CHOP組22例(CR14例,非CR8例),以20名體檢健康者為正常對(duì)照組。彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者均先行4個(gè)療程誘導(dǎo)化療,CR者繼續(xù)使用原方案鞏固

3、2-4個(gè)療程,非CR者更改二線(xiàn)方案繼續(xù)誘導(dǎo)化療。采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組外周血中Th17細(xì)胞比例,酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)外周血血清相關(guān)細(xì)胞因子白細(xì)胞介素17(IL-17)、IL-21、IL-23、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)的表達(dá)水平。分析比較利妥昔單抗對(duì)彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者的外周血Th17細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子的影響。②、體外實(shí)驗(yàn):DLBCL初治患者和體檢健康者各20例,每個(gè)對(duì)象分別采集4份外周血標(biāo)本,分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(P

4、BMCs),按照培養(yǎng)條件的不同分成4個(gè)亞組:空白組(A亞組)、加入利妥昔單抗組(B亞組)、加入利妥昔單抗和血清組(C亞組)和極化組(D亞組)(加IL-6和TGF-β)。培養(yǎng)后分別采用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各亞組外周血單個(gè)核細(xì)胞中Th17細(xì)胞比例,酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)上述培養(yǎng)液中白細(xì)胞介素17(IL-17)的表達(dá)水平。
　　結(jié)果:1、體內(nèi)實(shí)驗(yàn):①、初治組Th17細(xì)胞比例、IL-17、IL-21、IL-23水平分別為(0.67±0

5、.21)％、(5.929±1.342)pg/ml、(130.632±17.945)pg/ml、(51.681±9.808)pg/ml,均低于正常對(duì)照組的(2.53±0.63)%、(8.435±2.031)pg/ml、(149.265±12.316)pg/ml、(55.303±7.778)pg/ml(P<0.05);初治組TGF-β水平為(370.615±98.444)pg/ml,高于正常對(duì)照組的(311.895±73.365)pg/ml

6、(P<0.05)。②、RCHOP-CR組Th17細(xì)胞比例、IL-17、IL-21、IL-23水平分別為(2.38±0.59)%、(7.724±0.780)pg/ml、(148.412±7.355)pg/ml、(55.668±7.532)pg/ml,均高于初治組和CHOP-CR組[(1.07±0.37)%、(6.526±0.538)pg/ml、(132.119±7.700)pg/ml、(50.245±7.668)pg/ml](P<0.05

7、);RCHOP-CR組TGF-β水平為(283.904±59.223)pg/ml,低于初治組和CHOP-CR組[(341.481±95.597)pg/ml](P<0.05);而CHOP-CR組、RCHOP-非CR組、CHOP-非CR組和初治組之間Th17細(xì)胞比例和相關(guān)細(xì)胞因子差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2、體外實(shí)驗(yàn):①、正常對(duì)照組中,D亞組的Th17細(xì)胞比例和IL-17水平分別為(17.12±4.90)%、(45.735±10.

8、012)pg/ml,均明顯高于A(yíng)、B、C亞組(P<0.05)。②、DLBCL組A亞組的Th17細(xì)胞比例及IL-17水平為(0.69±0.24)%、(6.012±1.312)pg/ml,均低于正常對(duì)照組A亞組的(2.43±0.61)%、(8.217±1.681)pg/ml(P<0.05);③、在與利妥昔單抗一起體外培養(yǎng)后,DLBCL組中B、C和D亞組的Th17細(xì)胞比例分別為(2.34±0.48)%、(2.31±0.53)%和(16.92±

9、4.81)%,IL-17水平分別為(7.944±1.538)pg/ml、(7.957±1.533)pg/ml和(44.417±9.881)pg/ml,均高于A(yíng)亞組,且D亞組明顯高于B、C亞組(P<0.05);
　　結(jié)論:①、體內(nèi)及體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中Th17細(xì)胞比例顯著低于健康人。②、在彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤患者治療中,利妥昔單抗可升高Th17細(xì)胞比例,且與療效有關(guān),提示Th17細(xì)胞可能與彌漫大B細(xì)胞淋