獨(dú)活及穿山龍的研究.pdf

1、本論文運(yùn)用現(xiàn)代中藥化學(xué)、儀器分析等多種實(shí)驗(yàn)技術(shù)對(duì)中藥獨(dú)活和穿山龍作了研究。共分為兩部分： 第一部分：獨(dú)活的研究。包括獨(dú)活及指紋圖譜的研究進(jìn)展、獨(dú)活中蛇床子素的含量測(cè)定和獨(dú)活藥材的指紋圖譜研究。獨(dú)活為常用中藥，其原植物約在20種以上?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》(2000版)收載傘形科植物重齒毛當(dāng)歸AngelicapubescensMaximf.bierrataShanetYuan的干燥根為獨(dú)活正品，但商品獨(dú)活種類比較混亂，主流商品有川

2、獨(dú)活、香獨(dú)活、牛尾獨(dú)活和九眼獨(dú)活4大類。川獨(dú)活為栽培植物，香獨(dú)活為栽培或野生植物，它們的原植物為重齒毛當(dāng)歸；牛尾獨(dú)活的原植物為獨(dú)活，以上三大類都是傘形科植物。九眼獨(dú)活的原植物有食用土當(dāng)歸、龍眼獨(dú)活和柔毛龍眼獨(dú)活3種，屬于五加科植物。通過(guò)外觀形態(tài)有時(shí)很難區(qū)分，因此進(jìn)行獨(dú)活品種來(lái)源研究，測(cè)定其主要有效成分的含量，制定其相應(yīng)的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和指紋圖譜，指導(dǎo)獨(dú)活藥材的GAP規(guī)范化種植，整頓現(xiàn)有的藥材來(lái)源市場(chǎng)，開發(fā)獨(dú)活潛在的藥用價(jià)值。根據(jù)中華人民共和國(guó)

3、藥典2005版修訂成都會(huì)議精神，將獨(dú)活含量測(cè)定的薄層掃描法改為高效液相色譜法。建立了高效液相色譜法測(cè)定獨(dú)活中蛇床子素的含量。色譜柱：YWGODSC18柱(250mm×4.6mm，10μm)，流動(dòng)相：乙腈—水(6：4)，流速為1.0mL·min-1，檢測(cè)波長(zhǎng)：322nm，柱溫：室溫。蛇床子素在10～150μg·mL-1的濃度范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系(r=0.9999)，平均回收率(n=9)為99.5％。本方法簡(jiǎn)便、快捷、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，完成

4、了國(guó)家藥典委員會(huì)下達(dá)的任務(wù)。按照《中藥指紋圖譜研究指導(dǎo)原則(討論稿)》及有關(guān)文獻(xiàn)，研究并采用Rp-HPLC方法制訂了獨(dú)活藥材的指紋圖譜檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)。不僅可以進(jìn)行獨(dú)活的真?zhèn)舞b別，還可以同時(shí)測(cè)定其主要有效成分的含量。建立藥材的指紋圖譜標(biāo)定了10個(gè)特征峰，指紋圖譜采集時(shí)間為80min，8批藥材中，除1號(hào)(四川九原)樣品相似度最低，僅為0.64，其余7批相似度較高，在0.85～0.93之間。結(jié)果表明，本研究所建立的指紋圖譜分析方法的精確、重現(xiàn)性良好

5、、穩(wěn)定。 第二部分：穿山龍的研究。包括穿山龍的的研究進(jìn)展、穿山龍中薯蕷皂苷的提取分離、以薯蕷皂苷為對(duì)照品，采用HPLC-ELSD法對(duì)不同產(chǎn)地的穿山龍藥材和不同批次的地奧心血康膠囊的含量進(jìn)行測(cè)定。穿山龍為薯蕷科植物穿龍薯蕷DioscoreanipponicaMakino的干燥根莖，具有活血舒筋、消食利水、祛痰截瘧之功效。陜西是穿龍薯蕷的主要產(chǎn)地之一，資源較為豐富，為了進(jìn)一步開發(fā)和利用資源，對(duì)穿山龍主要成分薯蕷皂苷的提取分離、結(jié)構(gòu)鑒

6、定，并以薯蕷皂苷為對(duì)照品，對(duì)藥材和制劑進(jìn)行含量測(cè)定的系統(tǒng)研究。文獻(xiàn)報(bào)道的含量測(cè)定成分多用高效液相-紫外檢測(cè)法測(cè)定穿山龍中薯蕷皂苷元或酸水解后產(chǎn)生的薯蕷皂苷元的含量，而且測(cè)定穿山龍中薯蕷皂苷元須經(jīng)藥材酸水解、萃取、調(diào)節(jié)pH等步驟，操作繁瑣。由于薯蕷皂苷為甾體皂苷，分子式中沒(méi)有共軛結(jié)構(gòu)，采用紫外法檢測(cè)較為困難，故改用蒸發(fā)光檢測(cè)器，效果較好。本文采用HPLC-ELSD法(高效液相-蒸發(fā)光檢測(cè)器)，對(duì)穿山龍及其含藥制劑中薯蕷皂苷的含量進(jìn)行了測(cè)定

7、研究。實(shí)驗(yàn)重現(xiàn)性好，高效靈敏，為生藥及制劑的質(zhì)量控制提供依據(jù)。實(shí)驗(yàn)所用穿山龍藥材于2004年5月采自西安市長(zhǎng)安區(qū)豐峪口，挖取根莖，除去地上部分、須根和外皮(栓皮)，曬干，切段后適當(dāng)粉碎，約10kg，得薯蕷皂苷純品39.2g，提取率為0.39％。建立了HPLC-ELSD法測(cè)定了穿山龍和地奧心血康膠囊中薯蕷皂苷的含量。色譜柱：YWGC18柱，250×4.6mm，10μm；流動(dòng)相：乙腈：水(55：45)；流速：1.0mL·min-1；載氣流速

8、2.4mL·min-1；霧化溫度：90.3℃左右；柱溫：室溫。穿山龍中薯蕷皂苷的線性范圍為：80～600μg·mL-1(r=0.9998)。平均回收率為99.88％，RSD=1.25％(n=9)。地奧心血康膠囊中薯蕷皂苷的線性范圍為：160～600μg·mL-1(r=0.9999)。平均回收率為100.16％，RSD=1.65％(n=9)。本方法簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，可作為中藥穿龍薯蕷的質(zhì)量控制，亦可作為控制地奧心血康膠囊含量的標(biāo)準(zhǔn)。