廣西豬鏈球菌2型毒力因子的研究.pdf

1、本研究建立了豬鏈球菌2型四個主要毒力因子Cps、MRP、EF、Sly的四重PCR檢測方法，實(shí)驗(yàn)證明其特異性好，可檢測的最低菌量為20CUF/ml，適合樣品的大規(guī)模檢測。應(yīng)用以上建立的毒力因子四重PCR檢測方法對138份廣西豬鏈球菌2型菌株進(jìn)行了檢測，結(jié)果表明，127株分離自健康豬扁桃體的菌株的主要毒力基因型分屬為：mrp+epf+sly+和mrp+epf+sly-共104株，占81.9％，mrp+epf-sly+有1株，mrp+epf-

2、sly-有12株，mrp-epf-sly-有10株，共占18.1％。11株分離自病死豬器官的豬鏈球菌2型菌株毒力基因型都為mrp+epf+sly+。同時，對56株MRP基因PCR擴(kuò)增呈陽性的菌株進(jìn)行了部分測序，通過對核苷酸和推導(dǎo)氨基酸的同源性以及遺傳進(jìn)化系統(tǒng)樹的分析，將這56個菌株分為2個基因型，即：Ⅰ型和Ⅱ型。 Ⅰ型中包括：GX01、GX20-2、GX4Lin、GX6Lin，GXLP5、 GXB30、GXB45，GXB102，

3、GXB141，GXBM20，GXCDX23、GXCDX49、GXDL9、GXDL36、GXFS26、GXG42、GXG121、GXGG34，GXGL462、GXLB72、GXLB131、GXLP26、GXLS53、GXQL31、GXQP46、GXR147、GXRA63、GXWX193、GXWX209、GXWZ80、GXY134、GXY153、GXY160和GXZ22共34株。 Ⅱ型包括：GX2Lin、GX11Lin、GXB74、

4、GXB70、GXCLZ192、GXG6、GXGG35、GXGL547、GXHP99、GXJZ26、GXLJ122、GXQL11、GXQL25、GXR128、GXRA32、GXW32、GXW45、GXWX400、GXWZ241、GXYL12和GXYL16、GX12Lin共22株。 Ⅱ型又可分成Ⅱa亞型和Ⅱb亞型，Ⅱa亞型包括：GX2Lin、GX11Lin、GXB74、GXB70、GXCLZ192，GXG6、GXGG35、GXGL5

5、47、GXHP99、GXJZ26、GXLJ122、GXQL11、GXQL25、GXR128、GXRA32、GXW32、GXW45、GXWX400、GXWZ241、GXYL12和GXYL16共21株。GX12Lin歸為Ⅱb亞型。 Ⅰ型中34株菌株有29株來自健康豬、5株來自發(fā)病豬，它們的核苷酸同源性在98.8％-99.9％之間，與江蘇人源毒株98015核苷酸的同源性在99.0％-100％之間。22株Ⅱa亞型菌株中有20株來自健康豬