刺參（Stichopus japonicus）體壁膠原蛋白理化性質(zhì)和生物活性研究.pdf

1、刺參(Stichopus japonicus)是一種傳統(tǒng)的滋補佳品，含有多種生物活性物質(zhì)，具有抗凝血、免疫調(diào)節(jié)、降血脂、抗病毒、抗腫瘤等多種藥理作用。刺參體壁蛋白含量的40％以上為膠原蛋白，但是由于它的不溶解性，關(guān)于它的相關(guān)性質(zhì)報道很少。本文采用胃蛋白酶促溶的方法從刺參體壁中提取膠原蛋白，并研究了它的理化性質(zhì)、對血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(．ACE)的抑制活性和體外抗氧化活性。本文的主要工作及結(jié)論如下： (1)β一巰基乙醇、0.05mo1

2、／LNaOH溶液將刺參體壁進行預(yù)處理，胃蛋白酶促溶的方法提取膠原蛋白(PSC)。對實驗中各主要影響因素進行了分析，實驗結(jié)果表明以膠原提取率為指標(biāo)，胃蛋白酶提取的最佳條件為：pH2.0，溫度為4℃，底物濃度m(刺參體壁)：m(醋酸溶液)=l：10，加酶量6％，提取時間為48h。 (2)系統(tǒng)地研究了刺參體壁膠原蛋白的理化性質(zhì)。膠原蛋白為一種糖蛋白，經(jīng)硫酸一苯酚法測定，其含糖量為2.7％。測定了產(chǎn)物的紫外圖譜，符合膠原蛋白的特征。從刺

3、參體壁提取的膠原蛋白的氨基酸組成與I型膠原蛋白的氨基酸組成相似。在此基礎(chǔ)上對其進行了SDS—PAGE電泳，胃蛋白酶促溶性膠原蛋白是一種異三聚體的蛋白，推測由兩條α<,1>鏈和一條α<,2>鏈組成[(α<,1>)<,2>a<,2>]。胃蛋白酶提取的刺參膠原蛋白最大程度地保持了其天然結(jié)構(gòu)。熱變性溫度為24.3℃，刺參獨特的組織特征與其熱變性溫度有很大的關(guān)系。刺參體壁膠原蛋白最高溶解度出現(xiàn)在pH2～3。當(dāng)NaCl濃度大于8％以后，溶解度則隨鹽

4、濃度的增大而劇烈下降。與甘油相比，刺參體壁膠原蛋白顯示出更好的保水性。 (3)研究了對血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)的抑制效果，實驗結(jié)果表明了，刺參體壁膠原蛋白具有較高的抑制活性，IC<,so>值為1.34mg／mL。 (4)研究了刺參體壁膠原蛋白在鄰苯三酚自氧化體系中對超氧陰離子的清除作用和在Fenton體系中對羥基自由基的清除作用。膠原蛋白對超氧陰離子的清除作用隨著濃度的增加而增大，當(dāng)濃度為3mg／mL時，對超氧陰離子的