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文檔簡介
1、目的:通過復制燃煤型氟中毒大鼠模型,檢測睪酮及相關(guān)激素水平,觀察腎上腺網(wǎng)狀帶、睪丸間質(zhì)細胞組織學和超微結(jié)構(gòu)的變化,分析雄激素結(jié)合蛋白表達的變化,研究燃煤型氟中毒對大鼠睪酮分泌功能的影響及其機制,為燃煤型氟中毒對男性生殖內(nèi)分泌的損傷,提供科學的實驗依據(jù)。
方法:以SD大鼠為研究對象,按體重均衡隨機分為4組:對照組、高氟組、中氟組、低氟組。對照組給予普通飼料,染毒組喂飼含不同比例的燃煤型氟中毒病區(qū)煤烘玉米的飼料,復制燃煤型氟中毒動
2、物模型。分三個階段(90d,120d,180d)以股動脈放血法處死動物:①查看氟斑牙,氟離子選擇電極法檢測尿氟。②放射免疫法檢測血清和睪內(nèi)睪酮(T)及血清卵泡刺激素(FSH)、黃體生成素(LH)、促性腺激素釋放激素(GnRH)。③組織學觀察:光鏡下,觀察HE染色的睪丸間質(zhì)細胞和腎上腺網(wǎng)狀帶的結(jié)構(gòu)變化。④超微結(jié)構(gòu):透射電鏡下,觀察睪丸間質(zhì)細胞超微結(jié)構(gòu)的變化。⑤免疫組織化學:觀察并分析睪丸雄激素結(jié)合蛋白(ABP)表達的變化。
結(jié)果
3、:①90d各染毒組均出現(xiàn)氟斑牙、尿氟增加,隨氟劑量增加和染毒時間延長,中毒表現(xiàn)加重。②與對照組相比,各染毒組大鼠血清和睪內(nèi)睪酮均降低(p<0.01或p<0.05),且隨氟劑量增加和染毒時間延長,降低更明顯(p<0.01)。其中90d的血清睪酮水平,低氟組與對照組相比無統(tǒng)計學意義(p>0.05)③90d,LH、FSH無明顯變化(p>0.05)。120d、180d,均增高(p<0.05或p<0.01)。與對照組相比,各染毒組GnRH均降低(
4、p<0.01或p<0.05)。隨著染毒時間延長,各染毒組GnRH逐漸降低(p<0.01或p<0.05)。同階段內(nèi),染毒組隨氟劑量增加,GnRH增高(p<0.01或p<0.05)。④組織學觀察:a.中晚期高氟組、中氟組睪丸間質(zhì)水腫明顯,睪丸間質(zhì)細胞結(jié)構(gòu)模糊,細胞輪廓不清,甚至呈萎縮狀態(tài);b.各染毒組腎上腺網(wǎng)狀帶,均未見明顯損傷。⑤超微結(jié)構(gòu):染毒組睪丸間質(zhì)細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張,線粒體減少,脂滴數(shù)量減少,溶酶體增多,甚至可見胞漿出現(xiàn)大量脂褐素顆粒,
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