燃煤型氟中毒雌鼠卵巢細(xì)胞凋亡及機制研究.pdf

1、【目的】動態(tài)觀察燃煤型氟中毒誘導(dǎo)雌鼠卵巢細(xì)胞凋亡并探討其致卵巢細(xì)胞凋亡機制。
　　【方法】1.采用自由食用織金病區(qū)原煤加拌泥煤烘烤的玉米復(fù)制燃煤型氟中毒動物模型（對照組、中氟組、高氟組）；2.動態(tài)觀察雌鼠染氟期間牙齒的變化情況；3.采用離子選擇電極法、高溫灰化-氟離子選擇電極法測定雌鼠尿氟、骨氟含量；4.于不同時間段（60d、120d、180d）動情期處死雌鼠，分離卵巢。①稱重，計算卵巢的臟器系數(shù)。②電鏡下觀察卵巢組織亞微結(jié)構(gòu)及顆

2、粒細(xì)胞凋亡情況。③用TUNEL技術(shù)檢測卵巢顆粒細(xì)胞凋亡細(xì)胞數(shù)。④采用比色法測定雌鼠新鮮卵巢組織中SOD、MDA的含量變化。⑤用免疫組化法檢測卵巢顆粒細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Fas、Caspase-3的表達。
　　【結(jié)果】1.成功復(fù)制實驗動物模型。2.隨著染氟劑量增加以及染氟時間的延長，雌鼠氟斑牙癥狀逐漸加重。3.雌鼠尿氟、骨氟的含量隨著染氟劑量的增加以及染氟時間的延長而增加。4.各組別在不同染氟時間卵巢臟器系數(shù)比較均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.

3、05)。5.染氟組的卵巢組織亞微結(jié)構(gòu)產(chǎn)生變化，顆粒細(xì)胞出現(xiàn)凋亡。6.各對照組僅有少量的凋亡細(xì)胞，染氟組隨著染氟劑量的增加和時間的延長，凋亡細(xì)胞數(shù)明顯呈上升趨勢。7.在染氟時間相同的情況下，隨著染氟劑量的增加，SOD活性顯著性降低，MDA的含量顯著性升高；在染氟劑量相同的情況下，隨著染氟時間的延長，SOD含量和MDA含量的變化無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。8.隨著染氟時間的延長，染氟組雌鼠卵巢組織Fas蛋白含量增加，各組兩兩比較均具有統(tǒng)計

4、學(xué)意義（P<0.05）。在染氟劑量相同的實驗中，中氟組各組兩兩比較均具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）,其他組別比較無統(tǒng)計學(xué)意義。9、染氟組卵巢顆粒細(xì)胞Caspase-3蛋白表達量與對照組相比均升高，但在180d時高氟組卵巢顆粒細(xì)胞Caspase-3蛋白表達量比中氟組蛋白表達量減少。
　　【結(jié)論】1.氟中毒對卵巢生殖功能的毒性作用的強弱與染氟劑量、時間有關(guān)；2.氟可損害雌鼠自由基代謝和抗氧化系統(tǒng)功能，損害程度與染氟劑量關(guān)系密切，與染氟