圍生期TORCH感染后熒光檢測蛋白質(zhì)芯片制備的初步研究.pdf

1、目的：對玻片表面不同修飾方法進(jìn)行比較，選擇制備蛋白質(zhì)微陣列的表面修飾方法，并建立一種用蛋白質(zhì)芯片檢測血清中 TORCH 抗體的新方法。 方法：以玻片為基質(zhì)，采用瓊脂糖、多聚賴氨酸、氨基對玻片表面進(jìn)行修飾，通過點(diǎn)樣蛋白于修飾后的玻片制備蛋白質(zhì)微陣列，比較不同修飾方法對蛋白質(zhì)的固定效率：配制不同濃度的瓊脂糖溶液，根據(jù)熒光強(qiáng)度確定最佳瓊脂糖濃度；采用玻片表面修飾瓊脂糖膜制備蛋白質(zhì)抗原芯片，以熒光標(biāo)記二抗，檢測血清中 TORCH Ig

2、M 抗體。 結(jié)果：瓊脂糖修飾的玻片具有三維表面結(jié)構(gòu)，在固定的抗體濃度相同的情況下瓊脂糖修飾玻片熒光強(qiáng)度是多聚賴氨酸修飾玻片的1.4倍，是氨基修飾玻片的4.6倍。當(dāng)瓊脂糖濃度為1.0﹪、蛋白質(zhì)在載體上的固定效率和反應(yīng)活性最高。瓊脂糖修飾玻片作為載體制備的蛋白質(zhì)芯片可檢測到血清中微量 TORCH 抗體的存在，抗體之間交叉反應(yīng)可忽略不計。用 30 例陽性血清和 30 例陰性血清檢測，蛋白質(zhì)芯片檢測的靈敏度為93.3﹪，特異度為100