如意珍寶片對(duì)腦缺血大鼠運(yùn)動(dòng)功能障礙的改善作用鹽酸度洛西汀對(duì)大鼠應(yīng)激性胃潰瘍的保護(hù)作用機(jī)制研究.pdf

1、本研究論文主要分為兩部分:一、如意珍寶片對(duì)腦缺血大鼠運(yùn)動(dòng)功能障礙的改善作用;二、鹽酸度洛西汀對(duì)大鼠應(yīng)激性胃潰瘍的保護(hù)作用機(jī)制研究
　　一、如意珍寶片對(duì)腦缺血大鼠運(yùn)動(dòng)功能障礙的改善作用
　　本研究的目的是考察如意珍寶片對(duì)局灶性腦缺血大鼠運(yùn)動(dòng)功能障礙的影響，并初步探討其可能的作用機(jī)制。采用線栓法永久性阻斷大鼠大腦中動(dòng)脈致局灶性腦缺血(pMCAO)，術(shù)前連續(xù)3d給予如意珍寶片(i.g.)，術(shù)后長(zhǎng)期連續(xù)給藥，腦缺血24 h后進(jìn)行動(dòng)物

2、神經(jīng)行為評(píng)分，ELISA法測(cè)定缺血側(cè)腦組織勻漿中TNFα的含量變化，分別于術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行加速轉(zhuǎn)棍實(shí)驗(yàn)、平衡木實(shí)驗(yàn)、步態(tài)實(shí)驗(yàn)和開(kāi)闊場(chǎng)實(shí)驗(yàn)評(píng)估腦缺血大鼠的運(yùn)動(dòng)功能變化，術(shù)后42 d進(jìn)行TTC染色評(píng)估缺血大鼠腦梗死體積的變化。結(jié)果顯示，與模型組相比，腦缺血24 h后如意珍寶片0.5 g·kg-1組和1.0 g·kg-1組大鼠神經(jīng)行為評(píng)分分別下降14％和17％，缺血側(cè)腦組織勻漿中TNFα含量分別減少21％和55％;如意珍寶1.0 g·kg-

3、1組大鼠術(shù)后8、14、21、28、42 d加速轉(zhuǎn)棍持續(xù)時(shí)間分別延長(zhǎng)50％、33％、47％、46％、159％(P＜0.05)，術(shù)后20 d平衡木持續(xù)時(shí)間延長(zhǎng)71％（P＜0.05），術(shù)后24 d步態(tài)實(shí)驗(yàn)中大鼠后肢步寬明顯縮短24％(P＜0.05)，術(shù)后28 d自主活動(dòng)總路程無(wú)明顯變化，術(shù)后42 d腦梗死體積減少41％(P＜0.05)。以上結(jié)果表明，長(zhǎng)期連續(xù)灌胃給予如意珍寶片，可顯著改善大鼠腦缺血后的運(yùn)動(dòng)功能障礙，且這種改善作用可能與降低腦組

4、織中的炎癥反應(yīng)有關(guān)。
　　二、鹽酸度洛西汀對(duì)大鼠應(yīng)激性胃潰瘍的保護(hù)作用機(jī)制研究
　　本實(shí)驗(yàn)室前期研究結(jié)果顯示，鹽酸度洛西汀對(duì)大鼠應(yīng)激性胃潰瘍具有顯著的保護(hù)作用，本研究的目的是分別從氧化應(yīng)激、炎癥、HPA軸等三個(gè)方向探討鹽酸度洛西汀對(duì)大鼠應(yīng)激性胃潰瘍的保護(hù)作用機(jī)制。采用水浸拘束應(yīng)激(WIRS)致大鼠應(yīng)激性胃潰瘍，水浸拘束應(yīng)激6h后進(jìn)行大鼠胃黏膜PAS染色評(píng)估胃黏膜黏液屏障變化;生化法測(cè)定水浸拘束應(yīng)激6h后大鼠胃黏膜中還原型谷胱

5、甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、總一氧化氮(NO)的含量，以及過(guò)氧化氫酶(CAT)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)和髓過(guò)氧化物酶(MPO)的活性;ELISA法測(cè)定水浸拘束應(yīng)激6h后大鼠胃黏膜中TNFα、IL-1β、ICAM-1和NAP-2/CXCL7的含量;Western Blot法測(cè)定水浸拘束應(yīng)激6h后大鼠下丘腦中pCREB/CREB、pERK/ERK和pJNK/JNK的表達(dá)水平。結(jié)果顯示，(1)與正常

6、組相比，水浸拘束應(yīng)激6h后大鼠胃黏膜PAS染色陽(yáng)性層顯著減少并出現(xiàn)斷裂，胃黏膜失去完整性和連續(xù)性，提示應(yīng)激后大鼠胃黏膜糖黏蛋白含量降低，胃黏液屏障破壞，胃黏膜出現(xiàn)嚴(yán)重?fù)p傷;預(yù)先給予鹽酸度洛西汀(20 mg·kg-1，i.p.)可顯著增加胃黏膜PAS染色陽(yáng)性層厚度，且黏膜保持連續(xù)和完整，有效逆轉(zhuǎn)WIRS所致的大鼠胃黏膜損傷;(2)與正常組相比，水浸拘束應(yīng)激6h后大鼠胃黏膜內(nèi)GSH含量降低23％(P＜0.05)，NO含量減少75％(P＜0.

7、001)，MDA含量增加52％(P＜0.01)，SOD活性降低19％(P＜0.05)，GSH-Px活性降低19％(P＞0.05），CAT活性升高22％(P＜0.05);預(yù)先給予鹽酸度洛西汀(20 mg·kg-1，i.p.)后，WIRS大鼠胃黏膜中NO含量增加85％(P＜0.001)，MDA含量減少104％(P＜0.01)，CAT活性降低160％(P＜0.001)，SOD活性升高71％(P＜0.05)，但對(duì)GSH含量及GSH-Px活性無(wú)明

8、顯影響;(3)與正常組相比，水浸拘束應(yīng)激6h后，大鼠胃黏膜內(nèi)MPO活性增加47％(P＜0.001)，TNFα含量增加62％(P＜0.05)，IL-1β含量增加42％(P＜0.05)，ICAM-1含量增加58％(P＜0.01)，NAP-2/CXCL7含量增加65％(P＜0.05);預(yù)先給予鹽酸度洛西汀(20 mg·kg-1，i.p.)后，WIRS大鼠胃黏膜中MPO活性降低54％(P＜0.01)，TNFα含量降低81％(P＜0.05)，IL

9、-1β含量降低74％(P＜0.05)，ICAM-1含量降低84％(P＜0.01)，NAP-2/CXCL7含量降低79％(P＜0.05);(4)與正常組相比，水浸拘束應(yīng)激6h后大鼠下丘腦中CREB、ERK和JNK磷酸化水平均顯著增加，其總蛋白表達(dá)無(wú)明顯變化;預(yù)先給予鹽酸度洛西汀(20 mg·kg-1，i.p.)可顯著降低WIRS大鼠下丘腦CREB和ERK磷酸化水平，但對(duì)JNK磷酸化水平無(wú)明顯影響，且不影響CREB、ERK和JNK總蛋白的表

10、達(dá)水平。以上結(jié)果表明，預(yù)先給予鹽酸度洛西汀(20 mg·kg-1，i.p.)可維持WIRS后大鼠胃黏膜屏障的連續(xù)性和完整性，保護(hù)應(yīng)激所致的大鼠胃黏膜損傷，這種保護(hù)作用可能是通過(guò)抑制氧化應(yīng)激反應(yīng)、抑制中性粒細(xì)胞的激活、降低中性粒細(xì)胞-內(nèi)皮細(xì)胞的黏附及抑制HPA軸的活性而實(shí)現(xiàn)的，而且鹽酸度洛西汀可能是通過(guò)抑制下丘腦中ERK磷酸化，進(jìn)而抑制CREB的磷酸化激活，從而最終調(diào)節(jié)CRF mRNA表達(dá)而實(shí)現(xiàn)對(duì)HPA軸的抑制，從而發(fā)揮對(duì)胃黏膜的保護(hù)作用