反芻動物飼用乳酸菌和酵母菌的篩選及其對瘤胃發(fā)酵影響的研究.pdf

1、青貯飼料和酒糟飼料是反芻動物常見的粗飼料，其中富含乳酸菌、酵母菌，從中分離優(yōu)化篩選出優(yōu)質(zhì)菌株可作為反芻動物飼用乳酸菌、酵母菌具有重要的實際意義。本論文研究從青貯飼料和酒糟飼料中分別篩選乳酸菌和酵母菌及其對人工瘤胃發(fā)酵的影響。 試驗一，青貯飼料中飼用乳酸菌的分離、鑒定和優(yōu)化篩選試驗。從青貯飼料中篩選出3株乳酸菌，在不同溫度、初始pH值和瘤胃液含量3個因素3個水平下進行正交試驗。結(jié)果表明，培養(yǎng)基中添加葡萄糖2％、蛋白胨1％，添加菌液

2、量為3％，100mL三角錐形瓶裝液量為40mL，在溫度36℃、初始pH值為5.8、瘤胃液含量達20％條件下，培養(yǎng)24h后測定生物量，其中1號菌株生物產(chǎn)量最高，經(jīng)過中科院微生物所生理生化鑒定和基因測序結(jié)果可知，1號菌為乳酸菌屬的屎腸球菌(Enterococcus Faecium)。 試驗二，青貯飼料和酒糟飼料中飼用酵母菌的分離、鑒定和優(yōu)化篩選試驗。從青貯飼料和酒糟飼料中分離10株酵母菌。通過正交試驗的優(yōu)化篩選以及生長曲線的測定，得

3、出屬于酵母屬的10號菌株在溫度30℃、初始pH值為5、葡萄糖濃度2％、大豆蛋白胨濃度1％、麥芽汁粉0.3％，酵母膏0.3％、接菌量3％，轉(zhuǎn)速180 r/min，培養(yǎng)48h時，生物產(chǎn)量達到最高，細胞蛋白達到60.54mgN/dL，菌體細胞達到1.7×109 cell/mL。此菌經(jīng)過中科院微生物所鑒定10號菌為釀酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)。 試驗三，Enterococcus Faecium和Sacc

4、haromyces cerevisiae人工瘤胃體外發(fā)酵試驗。采用完全隨機試驗設計，分成3個處理組：1)添加控制日糧為對照組(CK)：2)5×107cell·g-1E.Faecium或者4×107 cell·g-1 S.cerevis(TR1)；3)2.5×108 cell·g-1 E.Faecium或者2.0×108 cell·g-1 S.cerevisiae(TR2)。通過對瘤胃pH值、NH3-N濃度、微生物蛋白(MCP)和揮發(fā)性脂

5、肪酸(VFA)的測定結(jié)果研究Enterococcus Faecium和Saccharomyces cerevisiae對人工瘤胃發(fā)酵的影響。試驗結(jié)果表明，添加E.Faecium對瘤胃pH值和MCP沒有影響(P＞0.05)；添加E.Faecium能夠顯著提高瘤胃NH3-N濃度(P＜0.01)；E.Faecium添加組(5×107cell.g-1)顯著提高了總揮發(fā)性脂肪酸與乙酸的濃度(P＜0.05)，而添加E.Faecium對瘤胃丙酸、丁酸

6、和乙酸與丙酸比例沒有影響(P＞0.05)。結(jié)果表明添加一定量的E.Faecium，可在不改變瘤胃發(fā)酵類型的情況下，促進飼料中碳水化合物的消化。添加S.cerevis對瘤胃pH值和NH3-N濃度沒有影響(P＞0.05)；S.cerevis對總揮發(fā)性脂肪酸、乙酸、丁酸和乙酸與丙酸比例沒有影響(P＞0.05)。研究結(jié)果表明，S.cerevis對瘤胃發(fā)酵的影響不大。通過對兩種菌的對比，可以看出，E.Faecium對瘤胃早期發(fā)酵內(nèi)環(huán)境各項指標影響