耐抽薹大白菜—結(jié)球甘藍(lán)易位系的獲得及抽薹相關(guān)基因的cDNa-AFLP分析.pdf

1、大白菜（Brassica rapa ssp.pekinensis，AA）為種子春化型植物，萌動的種子即可感受低溫完成春化，春夏季栽培很容易先期抽薹，使葉球失去商品價值和食用價值，給生產(chǎn)造成巨大損失。結(jié)球甘藍(lán)（Brassica oleracea var.capitata）為綠體春化型，較大白菜具有很強的耐抽薹性。本實驗室創(chuàng)制了大白菜染色體組背景下添加1條結(jié)球甘藍(lán)染色體的單體異附加系，其中添加結(jié)球甘藍(lán)4號染色體的大白菜單體異附加系表現(xiàn)最耐抽

2、薹。本研究在獲得大白菜—結(jié)球甘藍(lán)4號單體異附加系及其后代小孢子植株的群體基礎(chǔ)上，通過2年抽薹性鑒定，篩選出耐抽薹和易抽薹植株，并進(jìn)一步利用cDNA-AFLP對耐抽薹和易抽薹植株進(jìn)行分析。其研究結(jié)果如下:
　　1.以大白菜—結(jié)球甘藍(lán)4號單體異附加系及其自交后代的616個來自不同胚的小孢子植株群體為材料，綜合考慮顯蕾、抽薹、開花性狀，采用6級抽薹調(diào)查分級標(biāo)準(zhǔn)、5個抽薹評價等級，通過2年抽薹性調(diào)查，篩選出60份試驗材料，其中45株耐抽薹

3、植株和15株易抽薹植株。
　　2.通過花粉母細(xì)胞減數(shù)分裂觀察，初步對篩選出的耐抽薹植株染色體數(shù)目進(jìn)行鑒定，獲得了耐抽薹大白菜—結(jié)球甘藍(lán)易位系。并對獲得耐抽薹和易抽薹植株葉片、花器官、中肋、葉球、根等性狀進(jìn)行了觀測。
　　3.利用cDNA-AFLP技術(shù)，選用256對引物組合，對不同春化處理的上述耐抽薹和易抽薹植株葉片差異表達(dá)片段進(jìn)行分離。獲得差異條帶124條，包括1）耐抽薹材料有條帶，易抽薹材料無條帶的差異條帶71條。包括耐抽

4、薹材料不同春化處理間相關(guān)產(chǎn)物持續(xù)表達(dá)14條，遞增表達(dá)41條、遞減表達(dá)16條;2）耐抽薹材料無條帶，易抽薹材料有條帶的差異條帶53條。包括易抽薹材料不同春化處理間相關(guān)產(chǎn)物持續(xù)表達(dá)8條，遞增表達(dá)28條，遞減表達(dá)17條。受低溫調(diào)控表達(dá)的差異條帶共10條，包括耐抽薹材料有條帶，易抽薹材料無條帶的4條;耐抽薹材料無條帶，易抽薹材料有條帶的2條;耐易材料均表達(dá)的4條。
　　4.選取典型、清晰、穩(wěn)定的差異條帶95條進(jìn)行克隆及Blast分析。利用

5、NCBI進(jìn)行同源性比對和功能性分析，初步可分為9大類，其中能量和新陳代謝類基因7個，占總序列的23.33％;轉(zhuǎn)錄翻譯類基因5個，占總序列的16.67％;信號傳導(dǎo)類基因4個，占總序列的13.33％;膜和運輸類基因3個，占總序列的10％;宿主防御類基因2個，占總序列的6.67％;光合作用類基因1個，占總序列的3.33％;電子傳遞類基因1個，占總序列的3.33％;細(xì)胞壁水解類基因1個，占總序列的3.33％;形態(tài)建成類基因1個，占總序列的3.3