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文檔簡介
1、目的:通過給予小鼠持續(xù)辛辣食物灌胃后誘導(dǎo)出變態(tài)反應(yīng)模型,觀察防腐劑即尼泊金乙酯和染發(fā)劑即對苯二胺對皮膚的辛辣刺激反應(yīng)并檢測趨化因子受體CXCR3、CCR5、CCR3在皮膚和血液中的表達(dá)情況,探討趨化因子受體在變應(yīng)性皮炎中的作用與機制,為該疾病的預(yù)防和診治提供實驗依據(jù)。
方法:1、將140只體重在18-20g雌性小鼠,隨機分為7組,即空白組、尼泊金乙酯組、辛辣尼泊金乙酯組、對苯二胺組、辛辣對苯二胺組、混合組、辛辣混合組。將10%
2、辣椒煎液和白酒的混合液按10ml/(kg.d)給小鼠灌胃,空白組給予生理鹽水灌胃,每天一次。辛辣食物灌胃7天后觀察小鼠體征情況并評分。辛辣模型成功造成后,在小鼠腹部分別注射尼泊金乙酯和對苯二胺原液。7天后,在小鼠背部分別涂抹尼泊金乙酯和對苯二胺的稀釋液,48h后觀察皮膚反應(yīng),根據(jù)《化妝品衛(wèi)生規(guī)范》規(guī)定的皮膚變態(tài)反應(yīng)進行評分。2、取2cm×2cm的小鼠皮膚,一部分石蠟包埋做病理檢驗。一部分備用提取RNA。3、眼球取血法收集1.5ml全血,
3、利用淋巴細(xì)胞分離液分離單核細(xì)胞PBMC,提取RNA。4、通過RT-PCR法檢測皮膚和血液中CXCR3、CCR5、CCR3的表達(dá)情況。
結(jié)果:1、在動物刺激狀態(tài)評分中,辛辣組與對照組相比較,辛辣組有很明顯的刺激體征,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。在皮膚變態(tài)反應(yīng)及病理評分中,辛辣組與未辛辣組比較,辛辣組評分均升高,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);混合組與單一組比較,混合組評分均升高,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01)。2、皮膚中檢測結(jié)果:
4、辛辣組CXCR3、CCR5和未辛辣組CXCR3、CCR5比較,辛辣組評分均升高,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);混合組CXCR3、CCR5和單一組CXCR3、CCR5相比較,混合組評分均升高,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);各實驗組CCR3未見明顯變化,無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。3、血液中檢測結(jié)果:辛辣組CXCR3、CCR5和未辛辣組CXCR3、CCR5相比較,辛辣組評分均升高,有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.01);混合組CXCR3、CCR5和
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