山女鱒源致病性水霉菌的分離鑒定及其特性研究.pdf

1、山女鱒（Oncorhynchus masou masou）自引入我國并成功的完成人工繁育以來，基于其味道鮮爽，肉質細滑，營養(yǎng)價值高及具有保健作用等優(yōu)點，深受消費者們的青睞，因此在我國具有廣闊的市場前景。近年來，隨著山女鱒養(yǎng)殖規(guī)模和人工養(yǎng)殖技術的不斷壯大及快速發(fā)展，頻發(fā)的各種病害常常造成巨大的經濟損失。尤其是水霉病，由于其發(fā)病迅速，感染范圍廣，死亡率高而給山女鱒產業(yè)帶來了極大困擾并且嚴重阻礙了其持續(xù)發(fā)展。
　　本實驗分離純化一株山女

2、鱒源致病性水霉菌株，通過形態(tài)學觀察和分子生物學相結合的方法對其進行鑒定，并進行了人工感染魚卵的實驗，研究了不同生長條件對菌株生物學特性的影響和藥物防治水霉菌感染的效果。為水霉菌生物學特性及山女鱒水霉病的防治提供理論基礎。實驗結果如下:
　　1.采用傳統(tǒng)的方法分離純化一株水霉菌株，將其命名為SN。通過附著在油菜籽上水霉菌絲的形態(tài)，觀察到其菌絲分枝較少，呈透明管狀，無橫隔;菌絲頂端可生成棒狀孢子囊，內部產生游動孢子，游動孢子成熟后，便

3、從孢子囊中迅速釋放出，而新孢子囊以層出方式或側生出芽方式發(fā)生。在一定的生長條件下，菌絲頂端或中間可見球形或不規(guī)則形狀的厚垣孢子。當生長環(huán)境良好時，可產生藏卵器和雄器進行有性繁殖。這些形態(tài)特征與水霉屬水霉的形態(tài)基本相似。
　　2.此SN菌株的ITS rDNA序列與GenBank中水霉屬鮭水霉(GenBank登錄號為EU551152)的親緣關系最接近。因此，推斷菌株SN為鮭水霉（Saprolegnia salmonis），GenBan

4、k登錄號為KJ579137。
　　3.通過將山女鱒魚卵暴露于不同濃度的SN孢子懸液中，研究SN菌株的感染率，發(fā)現(xiàn)魚卵感染水霉病主要是通過水體中的孢子侵染導致的。孢子附著在魚卵上，并可在魚卵之間傳播;且水霉病的感染率均隨著養(yǎng)殖水體中孢子濃度的增加而升高，當初始濃度為1×105個/ml時，感染率最高達到82％，并且高濃度組與低濃度組之間差異顯著。
　　4.通過在不同條件下對菌株SN的生物學特性影響的實驗，適宜菌株SN生長的溫度范

5、圍為10～30℃，適宜生長的pH范圍在5～11;最適生長溫度為25℃，最適生長pH為8;菌株SN對NaCl較為敏感，在鹽度范圍為0.5％～2％內菌株雖可生長，但是隨著鹽度的升高菌株的生長明顯受到抑制。
　　5.本實驗選用過氧化氫、甲醛、孔雀石綠、檢科Ⅰ號等6種抗水霉制劑對水霉菌株SN孢子生長的影響進行研究，發(fā)現(xiàn)高濃度的各抗水霉制劑對SN抑制率高;并且過氧化氫和甲醛抑孢子的效果優(yōu)于孔雀石綠，而檢科Ⅰ號、亞硝酸鈉和過氧乙酸的抑制效果不