胰島素樣生長因子-1、血小板源性生長因子、轉(zhuǎn)化生長因子β1對人退變纖維環(huán)細(xì)胞生物學(xué)活性的影響.pdf

1、椎間盤細(xì)胞基質(zhì)包括膠原、蛋白聚糖等。椎間盤退行性病變表現(xiàn)為細(xì)胞數(shù)量和細(xì)胞基質(zhì)代謝的改變。生長因子有調(diào)整細(xì)胞增殖、分化及細(xì)胞基質(zhì)代謝的作用，可用于椎間盤退變的生物學(xué)治療。目前有關(guān)生長因子對纖維環(huán)細(xì)胞作用的研究偏少，本研究考察體外培養(yǎng)條件下IGF-1(胰島素樣生長因子-1)、PDGF(血小板源性生長因子)、TGF-β1(轉(zhuǎn)化生長因子-β1)對人退變纖維環(huán)細(xì)胞生物學(xué)活性的影響，以深入及擴(kuò)展生長因子對人類椎間盤退變的生物學(xué)治療的研究。

2、方法： 結(jié)合酶消化法和組織塊培養(yǎng)法，體外單層培養(yǎng)人退變纖維環(huán)原代細(xì)胞。傳代后通過免疫組織化學(xué)染色鑒定細(xì)胞。對傳3代細(xì)胞分別采用不同生長因子干預(yù)，根據(jù)文獻(xiàn)所查，選用相應(yīng)生長因子最佳作用濃度，分對照組、IGF-1組、PDGF組、TGF-β1組、IGF-1+PDGF組、IGF-1+TGF-β1組、PDGF+TGF-β1組、IGF-1+PDGF+TGF-β1組等8組。干預(yù)后第3、6d，采用MTT法測定細(xì)胞增殖，ELISA法測定細(xì)胞培養(yǎng)上

3、清液中Ⅰ、Ⅱ型膠原和Aggrecan含量。用Curve Expert1.3軟件將所測的OD值轉(zhuǎn)算為濃度值，數(shù)據(jù)運(yùn)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件分析。 結(jié)果： 傳3代細(xì)胞Ⅰ、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色陽性。IGF-I具有促人退變纖維環(huán)細(xì)胞增殖作用，輕度抑制細(xì)胞合成Ⅰ型膠原，促進(jìn)細(xì)胞合成II型膠原和Aggrecan，促Ⅱ型膠原合成作用強(qiáng)于TGF-β1。PDGF具有明顯促人退變纖維環(huán)細(xì)胞增殖作用，促增殖作用強(qiáng)于IGF-I，抑制細(xì)胞合