異硫氰酸苯已酯(PHI)誘導前列腺癌PC3細胞凋亡的分子機制研究.pdf

1、目的:觀察異硫氰酸苯己酯(PHI)對前列腺癌PC3細胞株增殖、凋亡的作用，研究PHI對前列腺癌細胞凋亡相關蛋白、組蛋白乙酰化、甲基化、Akt信號轉導通路的影響，闡述誘導凋亡的分子機制。 方法:采用MTT方法繪制PHI作用后PC3細胞的生長曲線；采用TUNNEL方法檢測PHI對PC3細胞凋亡的影響；用蛋白免疫印跡法(Western Blot)觀察PC3細胞凋亡相關蛋白BcL-2，caspase-9、caspase-3、McL-1、

2、Cyt-C、XIAP的變化及組蛋白乙?；疕3、H4，組蛋白甲基化H3K9、H3K4水平的變化；同時研究Akt信號轉導通路蛋白表達水平的變化。 結果:(1) PHI能抑制PC3細胞增殖，IC50約為20μmol/L，并能誘導PC3細胞凋亡，隨作用時間延長及濃度的增加，凋亡率漸上升，呈時效及量效關系；(2)PHI下調(diào)PC3細胞BcL-2，caspase-9、caspase-3、McL-1、Cyt-C、XIAP的表達，呈時效及量效變化

3、；(3) PHI處理3小時就可見增加PC3細胞組蛋白乙?；疕3、H4，組蛋白甲基化H3K4水平，降低甲基化H3K9水平；(4) PHI處理后3小時PC3細胞Akt信號轉導通路Akt及p-Akt均未見明顯變化，而作用7小時后，總蛋白Akt、mTOR、p70S6K的表達變化不明顯，而磷酸化蛋白p-Akt、p-mTOR、p-p70S6K均表達下降。 結論:(1) PHI可抑制PC3細胞的增殖并誘導其凋亡，可能與激活細胞內(nèi)源性凋亡通路有