JNK在大鼠利多卡因脊髓神經毒性中的作用研究.pdf

1、目的：探討c-Jun氨基末端激酶(c-jun N-terminal kinase，JNK)在大鼠利多卡因脊髓神經毒性中的作用。
　　方法：成年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠96只，體重240±20g，隨機分成6組（n=16）:正常大鼠組（Ⅰ組）、假手術組（Ⅱ組）、JNK抑制劑(SP600125)組（Ⅲ組）、二甲基亞砜(Dimethyl sulfoxide，DMSO)組（Ⅳ組）、10％利多卡因組（V組）、JNK抑制劑+

2、10％利多卡因組（Ⅵ組）。Ⅰ組不做任何處理，Ⅱ～Ⅵ組行鞘內置管術。置管后Ⅱ組不再做任何處理;Ⅲ組和Ⅳ組分別鞘內注射SP60012525μg和DMSO20μl;V組給予鞘內注射10％利多卡因20μl;Ⅵ組先鞘內注射SP60012525μg，30分鐘后鞘內注射10％利多卡因20μl。于鞘內置管術前，鞘內給藥前，鞘內給藥后4h、8h、12h、1d、2d、3d、4d、5d、6d分別測定大鼠后肢機械縮足反射閾值(Mechanical paw wi

3、thdrawal threshold，MWT)和熱縮足反射潛伏期(Thermal withdrawal htency, TWL)。子給藥后24h每組隨機取4只大鼠取脊髓腰膨大標本，用Western blot法檢測磷酸化JNK(p-JNK)及JNK的表達。各組另取4只大鼠的脊髓腰膨大，用原位末端缺口標記（TdT-mediated dUTP Nick-EndLabeling，Tunel）法檢測脊髓神經細胞凋亡情況。
　　結果：行為學變

4、化:與Ⅰ組比較，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組的MWT、TWL差異無統計學意義（P＞0.05），V組MWT、TWL在給藥后4h、8h、12h、1d、2d、3d、4d增加，給藥后第5d恢復到給藥前水平，差異有統計學意義(P＜0.05)，Ⅵ組MWT、TWL在給藥后4h、8h、12h、1d、2d增加，給藥后第3d恢復至給藥前水平，差異有統計學意義(P＜0.05);與V組比較，Ⅵ組在給藥后4h、8h、12h、1d、2d、3d、4d的MWT、TWL均較低，差異有統

5、計學意義（P＜0.05）。
　　蛋白表達變化:Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ組大鼠脊髓均有p-JNK表達，三組比較差異無統計學意義(P＞0.05)。與Ⅰ組比較，Ⅲ組脊髓p-JNK表達降低，V、Ⅵ組脊髓p-JNK表達增多，差異有統計學意義(P＜0.05);與Ⅵ組比較，V組脊髓p-JNK表達增多，差異有統計學意義(P＜0.05)。各組脊髓JNK的表達差異無統計學意義(P＞0.05)。
　　細胞凋亡:與Ⅰ組比較，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ組脊髓神經細胞凋亡情況差異無