張氏肝細胞Chang liver cell移植改善急性肝衰竭的預(yù)后.pdf

1、【目的】：Changliver細胞是一種肝腫瘤細胞系,其是否可用于生物人工肝支持系統(tǒng)尚未見報道。本研究通過體內(nèi)外實驗驗證其肝細胞功能,旨在尋找一種新的細胞源。
　　【方法】：通過Western-Blotting和激光共聚焦檢測Changliver細胞的肝細胞特異性蛋白表達情況,在體外評估其肝細胞功能。采用RT-PCR從基因水平檢測肝細胞功能相關(guān)基因的表達情況。采用SD大鼠90％肝切除術(shù)誘導(dǎo)急性肝衰竭(ALF)模型。取生長良好的Ch

2、angLiver細胞移植入大鼠脾臟內(nèi),并于移植后24小時行90%肝切除術(shù)誘導(dǎo)急性肝衰竭,每隔24小時采血一次,測定其肝功能指標(biāo)變化情況。并統(tǒng)計生存率。
　　【結(jié)果】：在體外,Western-Blotting和激光共聚焦清晰的顯示了ChangLiver細胞表達肝細胞特異性標(biāo)志蛋白,如白蛋白(ALB)、葡糖醛酸基轉(zhuǎn)移酶(UGT)及細胞色素酶P450(CYP3A4)。RT-PCR同樣可檢測到相關(guān)基因在mRNA水平的表達。在體內(nèi),實驗組接

3、受ChangLiver細胞移植,其長期生存率達到40%,而對照組的長期生存率為0(P<0.01)。移植ChangLiver細胞的大鼠肝功能在急性肝衰竭后24小時較對照組獲得明顯的改善,表現(xiàn)為血樣標(biāo)本中谷丙轉(zhuǎn)氨酶(ALT),谷草轉(zhuǎn)氨酶(AST),膽紅素和堿性磷酸酶(ALP)等指標(biāo)的下降(ALT,619.33±85.64vs.1798±424.06μ/l,G2vs.G1;AST,1732.83±162.37vs.3033.25±506.73