中藥“養(yǎng)肝合劑”聯(lián)合肝細(xì)胞移植對挽救急性肝衰竭受者生命的技術(shù)研究.pdf

1、目的： 本研究通過三個有序的小實驗，分階段探討中藥“養(yǎng)肝合劑”對進行肝細(xì)胞移植的急性肝衰竭大鼠的影響。 實驗一：尋找更接近人類病毒性肝炎誘導(dǎo)的急性肝衰竭動物模型，運用生化檢測和病理檢查來證實模型的可靠性和穩(wěn)定性； 實驗二：觀察中藥“養(yǎng)肝合劑”對體外培養(yǎng)肝細(xì)胞的影響； 實驗三：在急性肝衰竭鼠模型的基礎(chǔ)上使用肝細(xì)胞移植合并中藥“養(yǎng)肝合劑”治療，探索急性肝衰竭新的治療方法。 欲通過本研究為臨床上治療急性

2、肝衰竭提供一個全新的思路，探索肝細(xì)胞移植結(jié)合中醫(yī)治療急性肝衰竭的新途徑。 方法 實驗一：我們采用了TAA與內(nèi)毒素不同劑量、不同組合方式誘導(dǎo)SD大鼠，構(gòu)建急性肝衰竭的動物模型，對比組間生化檢查及病理檢查結(jié)果；實驗二：運用肝細(xì)胞培養(yǎng)及血清藥理學(xué)方法，比較基礎(chǔ)培養(yǎng)液、當(dāng)歸+基礎(chǔ)培養(yǎng)液及養(yǎng)肝合劑+基礎(chǔ)培養(yǎng)液三種不同的培養(yǎng)液對肝細(xì)胞生長、增殖等狀況的作用；實驗三：將按實驗一造模后的80只近交系大鼠隨機分為三組—移植組、移植+中藥組

3、、對照組，比較組間存活率和各生化指標(biāo)。 結(jié)果： 實驗一：單純二次TAA及第二次換用內(nèi)毒素均可形成急性肝衰竭的動物模型。其中，首日注射3％TAA300mg/kg次日注射內(nèi)毒素5μg/kg的方式造成的急性肝衰竭模型穩(wěn)定，存活窗口期達48h以上，便于治療性研究的開展，是一種相對理想的動物模型。實驗二：中藥“養(yǎng)肝合劑”對體外培養(yǎng)肝細(xì)胞的附壁生長、增殖速度具有明顯的促進作用，并顯著延長了體外培養(yǎng)的生存時間，提示“養(yǎng)肝合劑”可能對肝

4、細(xì)胞發(fā)揮作用具有促進作用，形成養(yǎng)肝護肝效應(yīng)。實驗三：實驗表明肝細(xì)胞移植雖然不能明顯減輕肝細(xì)胞損傷，但可明顯補償肝細(xì)胞的代謝功能，顯著降低血清直接膽紅素濃度、血氨濃度，提高血清白蛋白的水平，縮短凝血酶原時間，5天存活率大幅度提高。合用中藥“養(yǎng)肝合劑”后，5天存活率更進一步提高，降總膽紅素及血氨濃度，縮短凝血酶原時間更明顯，而且還可顯著降低血清ALT及AST水平，提示中藥“養(yǎng)肝合劑”合并肝細(xì)胞移植對挽救急性肝衰竭受者生命具有明顯的治療價值。