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文檔簡介
1、目的:通過以離體培養(yǎng)的阿勒泰大尾羊骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(Bone marrow stem cells,BMSCs)為種子細(xì)胞,高溫煅燒骨(Sintered bone,SB)為骨支架材料,構(gòu)建兩者的復(fù)合物形成組織工程化骨,與單純的高溫煅燒骨進(jìn)行比較。觀察兩者修復(fù)羊牙槽骨缺損的效果。
方法:選用12只成年阿勒泰大尾羊?yàn)閷?shí)驗(yàn)動物,在全麻下分批拔除每只羊的雙側(cè)下頜第一前磨牙,向根方去除遠(yuǎn)中根與第二前磨牙近中根之間的牙槽嵴間隔,形成大小為5
2、mm×5mm×5mm的骨缺損。用密度梯度離心貼壁培養(yǎng)法分離純化成年羊的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,經(jīng)礦化誘導(dǎo)為成骨樣細(xì)胞后與高溫煅燒骨支架材料復(fù)合形成組織工程化骨。實(shí)驗(yàn)分為組織工程化骨組、單純煅燒骨組及空白對照組三部分。實(shí)驗(yàn)手術(shù)后4周,8周,12周各處死動物4只,通過影像學(xué)和組織學(xué)方法檢測骨缺損區(qū)域修復(fù)效果。
結(jié)果:高溫煅燒后的松質(zhì)骨材料呈白堊色,具有蜂窩狀多孔結(jié)構(gòu),保留了天然松質(zhì)骨的多孔狀空間,孔隙率為66.10±1.32%,孔徑范圍
3、137.44μm-538.72μm。骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞接種到煅燒骨24小時后可見大量細(xì)胞黏附于支架上,7天后分泌大量細(xì)胞外基質(zhì),細(xì)胞與基質(zhì)分界不清。動物手術(shù)后4周,X線片可見組織工程化骨組和單純煅燒骨組骨植入材料完整包埋在術(shù)區(qū),煅燒骨材料邊緣可見一圈低密度陰影。HE染色可見實(shí)驗(yàn)側(cè)骨小梁形成,對照側(cè)無明顯骨修復(fù);術(shù)后8周HE染色可見實(shí)驗(yàn)側(cè)新骨形成,對照側(cè)只有纖維組織修復(fù)。術(shù)后12周HE染色可見新生牙槽骨已充滿骨缺損處,骨小梁成團(tuán)狀,實(shí)驗(yàn)組X
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