?；撬釋β1-40毒性的保護作用研究.pdf

1、目的:探討?；撬釋β1-40毒性的保護作用。
　　 方法:體內(nèi)實驗:用Aβ1-40注入SD大鼠海馬制備AD動物模型，將SD大鼠隨機分為:正常組、Aβ1-40模型組、假手術(shù)組、陽性治療組、牛磺酸小、中、大劑量組。陽性治療組給予哈伯因治療，?；撬嵝?、中、大劑量組給予不同劑量(1.6、3.2、4.79mM·kg-1·d-1)?；撬峁辔钢委?。通過Morris水迷宮進行行為學測試;尼氏染色觀察大鼠海馬神經(jīng)元的病理學改變;剛果紅染色觀察大

2、鼠海馬β淀粉樣肽的沉積。
　　 體外實驗:用Aβ1-40損傷人神經(jīng)母細胞瘤(SH-SY5Y)細胞作為AD細胞模型，將對數(shù)生長期的SH-SY5Y細胞分為:正常對照組、Aβ1-40模型組、牛磺酸小、中、大劑量組。?；撬嵝?、中、大劑量組分別加入終濃度為0.8、8、20mmol·L-1的?；撬犷A處理24h，再與模型組同時加入終濃度為20μ mol·L-1Aβ1-40，繼續(xù)培養(yǎng)24h。采用噻唑藍(MTT)比色法測定細胞的存活率;Hoech

3、st33258熒光染色觀察細胞凋亡;流式細胞技術(shù)（Flow cytometry，F(xiàn)CM）檢測細胞線粒體膜電位(mitochondrialmembrane potential，△ψm)的變化。
　　 結(jié)果:體內(nèi)實驗結(jié)果:Morris水迷宮實驗，與模型組相比，?；撬?.2、4.79mM·kg-1·d-1劑量組大鼠的逃避潛伏期縮短(P＜0.05)，穿越站臺次數(shù)及在第三象限停留時間延長(P＜0.05);尼氏染色結(jié)果顯示，Aβ1-40模型

4、組神經(jīng)細胞排列散亂，尼氏體碎裂、數(shù)量減少。給予3.2、4.79mM·kg-1·d-1?；撬嶂委煹拇笫蟠竽X海馬神經(jīng)元細胞排列較整齊，尼氏體數(shù)量增多，形態(tài)完整;剛果紅染色結(jié)果顯示，Aβ1-40模型組的橘紅色沉淀物較多，而給予3.2、4.79mM·kg-1·d-1?；撬嶂委煹拇笫蟠竽X切片橘紅色淀粉樣沉積相對減少。
　　 體外實驗結(jié)果:MTT法檢測，與模型組細胞存活率相比，0.8、8、20mmol·L-1?；撬犷A處理的大鼠細胞存活率升高

5、(P＜0.01，P＜0.05);與0.8mmol·L-1?；撬峤M相比，8.0、20.0mmol·L-1牛磺酸組細胞存活率明顯升高(P＜0.01); Hoechst33258染色觀察，?；撬嶂委熃M細胞呈均一完整的淡藍色熒光，與模型組細胞凋亡率相比，0.8、8、20mmol·L-1?；撬犷A處理的大鼠細胞凋亡率降低(P＜0.01);與0.8mmol·L-1牛磺酸組相比，8.0、20.0mmol·L-1?；撬峤M細胞凋亡率降低(P＜0.01);

6、FCM檢測結(jié)果，Aβ1-40模型組中細胞的△ψm較正常對照組降低(P＜0.01);0.8、8、20mmol·L-1?；撬犷A處理組的△ψm較Aβ1-40模型組增強((P＜0.05，P＜0.01);與0.8mmol·L-1?；撬峤M相比，8.0、20.0mmol·L-1牛磺酸組△ψm升高(P＜0.05)。
　　 結(jié)論:?；撬峥商岣逜β1-40致AD大鼠的學習記憶能力，增加神經(jīng)元數(shù)量，可能具有干擾Aβ聚集的作用;?；撬釋β1-40致S