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文檔簡介
1、目的: 構建含有人可溶性TRAIL(sTRAIL)基因的重組慢病毒載體,觀察sTRAIL在不同靶細胞中的表達,并觀察聯(lián)合三氧化二砷(ATO)對細胞周期變化和誘導細胞凋亡作用的影響。 方法: 構建攜帶人sTRAIL的重組慢病毒載體,在體外感染正常人肝細胞HL-7702、人胚肺成纖維細胞HFL-1、人胃癌細胞SGC-7901、人胰腺癌細胞SW 1990,應用酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)評價sTRAIL蛋白在腫瘤細胞中的表達,采用F
2、CM檢測細胞凋亡率及細胞周期的變化。 結果: 成功包裝出含有sTRAIL基因的重組慢病毒,滴度可達(1.68±0.54)×106IU/ml;重組慢病毒轉導使sTRAIL在消化道腫瘤細胞中高效表達,聯(lián)合ATO可誘導SGC-7901和SW 1990細胞凋亡,而對HL-7702等人正常細胞無明顯誘導凋亡作用。 結論: 成功構建了重組慢病毒表達載體pXZ208-sTRAIL,包裝后在體外可以有效感染人胚腎細胞(293T)、HFL
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