1、PPAR-γ抑制劑T0070907對鼻咽癌細(xì)胞生長的影響;2、2006-2007年中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院醫(yī)院感染調(diào)查.pdf

1、研究背景及目的： 鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC)是我國常見的頭頸部腫瘤，在南方尤其廣東地區(qū)高發(fā)。其中95％以上鼻咽癌患者為低分純鱗癌和未分化癌，惡性程度高，生長快，易發(fā)生轉(zhuǎn)移，75％確診時已屬于晚期，單一放療對于晚期患者療效欠佳，目前化療成為晚期鼻咽癌治療的主要手段之一，但現(xiàn)有化療療效不盡人意，分子靶向藥物的發(fā)展為NPC的治療帶來新的機遇，尋找新的治療靶點成為目前研究的熱點。 過氧化物

2、酶體增殖物激活受體γ(peroxisorne proliferator—activated receptor—γ，PPAR—γ)屬于細(xì)胞核受體超家族成員，與配體結(jié)合才能被活化，激活后與視黃酸X受體(retinoid X receptor．RXR)結(jié)合形成異二聚體，該異二聚體與靶基因啟動子的應(yīng)答元件(peroxisome proliferator response elements，PPREs)結(jié)合，同時招募共刺激因子調(diào)節(jié)靶基因的轉(zhuǎn)錄，從

3、而在脂肪形成、脂質(zhì)代謝、維持血糖穩(wěn)定及調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng)等生物學(xué)效應(yīng)中發(fā)揮重要作用。近年來，PPAR—γ在腫瘤發(fā)生發(fā)展中的作用成為大家研究的熱點。業(yè)已證實PPAR—γ在多種惡性腫瘤組織中均有表達，如肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、前列腺癌及乳腺癌等。許多研究表明通過抑制腫瘤細(xì)胞PPAR—γ的表達能夠抑制諸如肝癌、食管癌、胃癌等腫瘤細(xì)胞的生長，并誘導(dǎo)凋亡、引起細(xì)胞周期阻滯、降低腫瘤細(xì)胞粘附及遷徙能力，提示PPAR—γ可以作為一種新的治療腫瘢的分子靶點之一。

4、T0070907作為一種新型合成的PPAR—γ抑制劑，對PPAR—γ具有較強的親和力和較高的選擇性，通過影響PPAR—γ配體結(jié)合域第12螺旋的構(gòu)象調(diào)節(jié)PPAR—γ和共刺激因子的相互作用而抑制其活化。有關(guān)PPAR—γ在鼻咽癌中的研究卻鮮有報道，本實驗主要通過研究PPAR—γ抑制劑T0070907對人鼻咽癌細(xì)胞的作用及其可能機制，探索其作為新的鼻咽癌治療的分子靶向藥物的可能性。 研究方法： 采用RT—PCR(reverse

5、transcriptase—polymerase chain reaction，RT—PCR)和蛋白印跡法(Western blot)方法檢測PPAR—γ在正常鼻咽上皮(NP69)和NPC細(xì)胞株(CNE1，CNE2，HONE1，SUNE1，5-8F)中mRNA和蛋白水平的表達；3-(4，5-二甲基—2-噻唑)—2，5-二苯基溴化四唑(MTT)法檢測T0070907對NPC細(xì)胞生長情況的影響；流式細(xì)胞術(shù)檢測T0070907對鼻咽癌細(xì)胞的細(xì)

6、胞周期和細(xì)胞凋亡的影響；Westernblot檢測T0070907對NPC細(xì)胞的細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達的影響作用。 研究結(jié)果： 1.PPAR—γ在鼻咽癌細(xì)胞株中的表達情況RT—PCR和Westernblot方法檢測結(jié)果顯示，PPAR—γ在正常鼻咽上皮細(xì)胞(NP69)和5株鼻咽癌細(xì)胞(CNE1，CNE2，HONE1，SUNE1，5-8F)中均有表達。且PPAR—γ在NP69中的表達明顯低于鼻咽癌細(xì)胞株中的表達，在高分化細(xì)胞株

7、CNE1中的表達低于低分化細(xì)胞株CNE2中的表達。 2.T0070907對CNE1、CNE2細(xì)胞PPAR—γ蛋白表達的影響Westernblot方法檢測結(jié)果顯示，用6.25、12.5、25μmol/L的T0070907處理后，CNE1、CNE2細(xì)胞中PPAR—γ蛋白的表達下降，且隨著濃度的升高下降越明顯。 3.T0870907對鼻咽癌細(xì)胞增殖的影響MTT法結(jié)果顯示不同濃度的T0070907對5株鼻咽癌細(xì)胞均有增殖抑制作用

8、，且隨著濃度的增加，抑制作用越顯著。其中T0070907對CNE1，CNE2，HONE1，SUNE1，5-8F各細(xì)胞的IC50(the50％inhibitoryconcentrationIC50)值分別為12.61±0.48μmol/L、14.40±0.71μmol/L、20.5+0.35μmol/L、26.93±1.03μmol/L、19.23±1.31μmol/L。由于T0070907對CNE1、CNE2的抑制作用比較明顯，故在不同

9、時間點對CNE1、CNE2進行了檢測，結(jié)果顯示，隨著作用時間的延長，T0070907對其的抑制作用越明顯，呈現(xiàn)濃度和時間依賴性。 結(jié)論： 1.PPAR—γ在鼻咽癌細(xì)胞中有表達； 2.PPAR—γ抑制劑T0070907能夠抑制鼻咽癌細(xì)胞增殖； 3.PPAR—γ抑制劑T0070907使鼻咽癌細(xì)胞CNE1，CNE2細(xì)胞周期阻滯在G2/M期，但并不能引起細(xì)胞凋亡； 4.PPAR—γ抑制劑T0070907引

10、起的細(xì)胞周期G2/M期阻滯，可能通過對細(xì)胞周期相關(guān)蛋白CyclinA、CyclinB1、Cdc2、pCdc2及Cdk2等蛋白的調(diào)控實現(xiàn)。 研究背景及目的： 醫(yī)院感染已經(jīng)成為一個全球關(guān)注的問題。2006年一項4國家的醫(yī)院感染調(diào)查顯示，英國的感染率為8.2％，威爾士為6.4％，北愛爾蘭為5.4％，愛爾蘭共和國為4.9％。據(jù)全國醫(yī)院感染監(jiān)控系統(tǒng)的報告顯示，我國1987年醫(yī)院感染的現(xiàn)患率為9.7％，2001年為5.2％，2003年

11、為4.8％，2005年為4.8％。說明經(jīng)過多年努力，我國醫(yī)院感染的控制已經(jīng)取得一定成績。然而腫瘤患者這個特殊人群的院感發(fā)生情況還缺乏大規(guī)模的調(diào)查。隨著腫瘤發(fā)病率的增加，該群體人數(shù)逐漸增多，腫瘤患者總體患病年齡偏高，且本身免疫力下降，加上化療、放療和手術(shù)等治療帶來的毒副作用，極易發(fā)生醫(yī)院感染，故腫瘤患者的醫(yī)院感染問題應(yīng)引起足夠的重視。雖然缺乏大規(guī)模的腫瘤患者院感現(xiàn)患率的調(diào)查，各醫(yī)院腫瘤患者院感發(fā)生率波動較大，但從一些散在報道來看，其感染率

12、較綜合醫(yī)院平均水平高。本文中我們主要對中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院2006年1月至2007年12月期間發(fā)生醫(yī)院感染的情況、病原菌菌譜分析和耐藥性檢測的報告進行調(diào)查和分析，以提高我們對腫瘤患者院感狀況的認(rèn)識和了解，為感染的預(yù)防和治療提供參考。 資料來源與方法：： 收集2006年1月至2007年12月各科室上報的在中山大學(xué)腫瘤醫(yī)院住院治療并發(fā)生醫(yī)院感染的952例腫瘤患者病歷資料，進行回顧性調(diào)查，采用EXCEL8.0建立數(shù)據(jù)庫對醫(yī)院感染一

13、般情況、病原菌分布及耐藥情況進行統(tǒng)計，SPSS10.0軟件對相應(yīng)數(shù)據(jù)進行分析。同時，查閱抗生素使用情況調(diào)查表，了解抗生素的使用情況、聯(lián)合使用情況和抗生素的種類。 結(jié)果： 1、醫(yī)院感染發(fā)生的一般情況2006年1月至2007年12月期間我院住院患者共50011例，其中發(fā)生醫(yī)院感染共952例。醫(yī)院感染患者的感染率為1.9％，發(fā)生感染1059例次，例次感染率為2.1％。兩年間共漏報28例次，平均漏報率為2.9％。感染患者的年齡為

14、2～87歲，中位年齡為47歲；男性656例，女性296例；從住院到發(fā)生醫(yī)院感染的時間為3～229d，中位時間為26.3d。 2、感染易感因素發(fā)生醫(yī)院感染的腫瘤患者中，由于癌癥本身因素所致的感染率為1.5％，占醫(yī)院感染各因素的31.7％；化療所引起的患者的感染率為1.2％，占各因素的25.7％；放療相關(guān)的感染發(fā)生率為3.4‰，占各因素的7.4％；除此之外，手術(shù)和侵入性操作所致的感染率分別為2.7‰、2.5‰，占5.9％、5.3％。

15、 3、感染部位 本調(diào)查顯示，感染發(fā)生部位以呼吸系統(tǒng)為主，占感染的43.7％，其次是腹部和消化系統(tǒng)，占19.1％，口腔感染占13.2％。 4、科室感染率各科室的感染情況來看，ICU的感染率最高，達21.4％，其次為綜合科、鼻咽科，分別為4.84％、4.69％。從醫(yī)院感染構(gòu)成比來看，內(nèi)科居首位，占53.36％，其次為放療科，占10.19％，再為鼻咽科和綜合科，分別占7.67％、7.35％，而ICU僅占0.32％。

16、 5、感染病原菌的分布952例發(fā)生醫(yī)院感染的患者中，分離出了病原菌794例，檢出率為83.4％。其中檢出革蘭陰性球菌321例，占所有病原菌的40.4％，主要是大腸埃希氏菌的感染；真菌265例，占33.4％，以白色假絲酵母菌感染為主；革蘭陽性球菌208例，占26.2％，主要是葡萄球菌屬和鏈球菌屬感染。 6、醫(yī)院抗生素的使用情況我院抗生素使用率達到74.8％。使用單藥的占51.1％；二聯(lián)占39.2％；三聯(lián)及以上占9.7％。其中，

17、頭孢類的抗生素使用率最高，達到44.7％；喹諾酮類占23.0％；其他種類的抗生素則均在10％以下。 7、各病原菌對抗生素的耐藥情況藥敏結(jié)果提示革蘭陰性桿菌主要對亞胺培南、丁胺卡那霉素敏感，而對氨芐西林的耐藥率則在90％以上：革蘭陽性球菌對萬古霉素高度敏感，此次調(diào)查中沒有發(fā)現(xiàn)對萬古霉素耐藥細(xì)菌，而對氨芐西林耐藥嚴(yán)重；真菌對兩性霉素B、伏立康唑及氟胞嘧啶敏感，而對氟康唑的敏感性稍差。 結(jié)論： 由于腫瘤患者本身的特殊性