蟾蜍皮抗癌活性成分的正交分離純化研究.pdf

1、蟾蜍皮作為重要的藥用資源，在亞洲有著悠久的藥用歷史，其含有大量具有強(qiáng)心、抗癌等功能的活性成分，也是多種強(qiáng)心、抗癌制劑的原料藥材。本文針對(duì)蟾皮中化學(xué)成分復(fù)雜、分離純化困難的問(wèn)題，基于新型分離材料，發(fā)展了多種高效高選擇性的二維正交液相色譜方法。針對(duì)不同類型的活性成分一極性含氮化合物及蟾蜍二烯內(nèi)酯類化合物，開(kāi)展了高效分離方法和化合物純化制備的研究;同時(shí)還發(fā)展了一種簡(jiǎn)單高效的3位磺酸化總蟾毒配基的合成和富集新方法。
　　針對(duì)蟾皮提取物中的

2、強(qiáng)極性組分在普通反相C18柱上保留弱、分離難的問(wèn)題，基于新型極性修飾的C18HCE材料，發(fā)展了強(qiáng)極性含氮化合物高效制備新方法。該方法成功地解決了強(qiáng)極性含氮化合物的反相弱保留問(wèn)題，獲得了較好的分離選擇性，并制備得到7個(gè)高純度化合物，其中3-Hydroxy-4H-Pyrazolo[4，5-d] Pyridazin-7(1H)-One為新化合物，hypoxanthine為從蟾皮中首次分離。
　　針對(duì)氨基酸修飾的蟾蜍二烯內(nèi)酯(AACBs)

3、和非氨基酸修飾的蟾蜍二烯內(nèi)酯(AAUBs)離子性的差異，基于表面帶有正電荷的XCharge C18柱，發(fā)展了一種新型高選擇性分離AACBs和AAUBs的反相液相色譜法，并對(duì)蟾皮中不同組分進(jìn)行了方法適用性考察。采用XCharge C18柱解決了AACBs在普通反相C18柱上拖尾的問(wèn)題，并且化合物的分離度和峰形都有了很大的改善。從其中一個(gè)組分中分離純化并鑒定了8個(gè)化合物，包括4個(gè)AACBs和4個(gè)AAUBs。
　　鑒于AACBs和AAU

4、Bs親水性不同，基于新型親水色譜固定相Click TE-Cys，發(fā)展了一種類分離方法，實(shí)現(xiàn)了AACBs和AAUBs的選擇性類分離，解決了兩類化合物在反相色譜模式下的共流出問(wèn)題。從一個(gè)抗癌活性組分中分離純化得到12個(gè)高純度的化合物，加速了此類活性化合物的發(fā)現(xiàn)過(guò)程。
　　以沙蟾毒精化合物為例，發(fā)展了一種簡(jiǎn)單高效的3位磺酸化沙蟾毒精的合成和富集方法，通過(guò)對(duì)總蟾毒配基的磺酸化，實(shí)現(xiàn)了大量具有潛在抗癌活性的3位磺酸蟾毒配基的化學(xué)合成和富集，