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文檔簡介
1、[目的]研究人參皂苷Re對db/db小鼠脂代謝的影響,并探尋其可能的作用機制。
[方法]18只雄性基因缺陷的肥胖db/db小鼠,隨機分為Re處理組和對照組。適應(yīng)性喂養(yǎng)一周后,分別予以40mg/kg的Re或等體積溶媒每日一次腹腔注射,每日定時記錄小鼠的體重和攝食量。給藥8周后,眼眶采集血標(biāo)本,用以測定血脂含量,頸椎脫臼法處死小鼠,并快速剪取小鼠肝臟、皮下脂肪、內(nèi)臟脂肪組織,稱重后置于-80℃冰箱內(nèi)保存?zhèn)溆?。同時剪取部分組織放入4
2、%的多聚甲醛固定液中固定,行石蠟包埋和HE染色,觀察各組織細胞形態(tài)學(xué)變化。提取各組織RNA及蛋白質(zhì),Real-timePCR和Western-blot的方法研究脂代謝相關(guān)信號通路基因和蛋白水平的變化。
[結(jié)果](1)給藥前兩組小鼠體重?zé)o顯著差異(39.194±1.151g VS39.286±0.854g,P>0.05),但給藥第2周開始,Re處理組小鼠體重顯著低于對照組(P<0.05),這種差異一直持續(xù)到實驗結(jié)束;(2)Re處
3、理組小鼠每日平均攝食量與對照組相比無顯著差異(P>0.05);(3)Re處理組小鼠肝臟、皮下脂肪、內(nèi)臟脂肪組織重量均顯著低于對照組(P<0.05);(4)Re處理組小鼠肝臟、皮下脂肪、內(nèi)臟脂肪組織重量占相應(yīng)體重的比例顯著低于對照組(P<0.05);(5)Re處理組db/db小鼠血清中甘油三酯(Triglyceride TG)、總膽固醇(Total cholesterol TC)的含量顯著低于對照組(P<0.05);(6)測定肝臟組織中甘
4、油三酯含量結(jié)果顯示:Re處理組db/db小鼠肝內(nèi)脂肪含量顯著低于對照組(P<0.05);(7)肝臟組織HE染色結(jié)果觀察:Re處理組肝臟組織中脂肪沉積顯著少于對照組;(8)皮下脂肪、內(nèi)臟脂肪組織Real-time PCR結(jié)果示,Re處理組與對照組相比,MCAD、LCAD及CPT1β等與脂肪酸氧化代謝相關(guān)的多個基因mRNA水平顯著上調(diào)(P<0.05);(9)肝臟組織Real-time PCR結(jié)果示:Re處理組MCAD、LCAD及CPT1β等
5、與脂肪酸氧化相關(guān)基因的mRNA水平較對照組顯著上調(diào)(P<0.05),但FAS、C/EBPβ等與脂肪生成相關(guān)基因的mRNA表達水平較對照組顯著下調(diào);(10) Western-blot結(jié)果示:Re處理組小鼠肝臟組織中P-AMPK的表達水平顯著上調(diào)。
[結(jié)論](1)Re不影響db/db小鼠的攝食,但可顯著抑制其體重增加;(2) Re能顯著降低db/db小鼠血清甘油三酯和膽固醇的含量;(3)Re能顯著改善db/db小鼠肝臟組織脂肪的沉
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