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1、湖北工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文L鳥氨酸產(chǎn)生菌的原生質(zhì)體融合育種及發(fā)酵條件研究姓名:張婧芳申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):發(fā)酵工程指導(dǎo)教師:汪江波20090501湖北工業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文1AbstractAccordingtothetheoryofmetaboliccontr01fermentation,thedissertationfocusesonthebreedingandfermentationconditionofLOrnithinehigh
2、yteldingstrainThemainresearchcontentsandresultsareasfollows:(1)CorynebacteriumglutamicumS9114WaSadopted船startingstrainscreenbyFluoroacetateandGlutamineaftermutationofUVandLiClintheformofsoloandcompositionConsequentlyHGG7
3、fromcompoundmutatedofUVandLiCl0f6329∥LwasscreenoutTheproductionvolumeofLornithinethantheoriginalstrainincreasedl024%(2)TheoptimumconditionsofprotoplastofCorynebacteriumglutamicumHGG7andCorynebacteriumglutamicumHG10617wer
4、ederminedTheprotoplastyieldof98%fromMScultureforprecultureatfirstsodiumpenicillinpretreatmentunder04U/mLlaterfor2hwithHG—G7and09U/mLlaterfor25hwithHG106—17ToHG—G7,10mg/mL12henzymolysiswithlysozymeatlast,butHG10617,14m∥mL
5、14henzymolysiswith34℃(3)TheoptimumconditionsofprotoplastfusionofCorynebacteriumglutamicumGC126andCorynebacteriumglutamicumHG10617werederminedTheprotoplastfusionrateof2610。from35%PEGpretreatment1aterfor35minunder36℃winlHG
6、G7andHGl0617(4)Byhypertonicselectionmedium,directionalselection39fusantswiththepurposeofgeneticmarkersThe39fusantswereadoptedstartingscreenandsecondscreeningbytheresistancemediunlConsequentlyRH169witllLomithineyieldof193
7、1∥LwasscreenoutAndbycontinuouspassage,theresultsshowthattheGenetictraitstabilitywithRHl69(5)ThebacthfemrentationconditionoftheLomithinehighproducingstafininshakeflaskwasstudiedinthisdissertationThefermentationmediunrwaso
8、ptimizedbysinglefactoroptimizationandorthogonaldesignexperimentThebestfermentationmediumand(g/L1:Glucose70、(NH4)S0480、Cornsteepliquor35、Yeastextract25、MgS04‘7H2004、K2HP0405、KH2P0405、FeS047H20O2、MnS04‘H2002、LArg05、CaC0320
9、,Biotin20I_tg/L,VB120Itg/L(6)BystudyingdifferentfermentationconditionsontheL—omithinefermentation,thebestfermentationconditionswasoptimiezd:PH7072:Fermentationtemperature30℃:Liquidvolume35mL/500mL;Shakerspeed220r/min;Fer
10、mentationcycle72h。Undertheoptimumcondition,thestrainRH169couldproduceLornithine2236/LbyshakingflaskbatehefmrentationTheproductionimproved1396%comparedwiththeinitialconditionsKeyword:Lomithine,Corynebacteriumglutamicum,pr
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