水產(chǎn)品中尼泊金酯、磺胺和孔雀石綠殘留檢測(cè)的方法學(xué)研究.pdf

1、獸藥殘留造成食品安全問(wèn)題已廣泛存在,嚴(yán)重危害人類(lèi)的健康。當(dāng)前水產(chǎn)食品中尼泊金酯、磺胺和孔雀石綠殘留檢測(cè)方法前處理復(fù)雜,精確度不高。因此,急需能夠快速高效檢出殘留的分析方法用于食品安全分析。
　　 通過(guò)使用經(jīng)典van Deemter和Knox曲線(xiàn)方程,以及新型Poppe曲線(xiàn)方程,對(duì)熔融核填料Halo-C18色譜柱與常規(guī)全多孔超高壓BEH-C18色譜柱柱效進(jìn)行比較。在BEH-C18柱的傳質(zhì)阻力主導(dǎo)部位,塔板高度隨著流速v的增大而增大

2、,但是Halo-C18色譜柱的塔板高度隨著流速v的增大趨于平衡。這說(shuō)明Halo-C18色譜柱的傳質(zhì)阻力項(xiàng),遠(yuǎn)比BEH-C18色譜柱小。Halo C18色譜柱的熔融核結(jié)構(gòu)明顯改善了流動(dòng)相在色譜柱內(nèi)的流動(dòng)動(dòng)力,減少了傳質(zhì)阻力,賦予了色譜峰更好的分離度與分離效率。因此,實(shí)驗(yàn)選用Halo-C18色譜柱,建立海鮮調(diào)味品中尼泊金酯類(lèi)防腐劑快速定量測(cè)定方法。尼泊金酯(對(duì)羥基苯甲酸酯)是一類(lèi)低毒高效的消毒滅菌防腐劑,已被廣泛用于食品、飲料、化妝品、醫(yī)藥

3、等許多行業(yè),我國(guó)GB2760-2011規(guī)定:對(duì)羥基苯甲酸乙酯用于醬油、醬料,最大使用量為0.25g/kg經(jīng)驗(yàn)證,該方法檢出限為20 ng/mL,線(xiàn)性良好(R2為0.9996～0.9999)。日內(nèi)/日間精密度小于7.08％。在100,200 and500 ng/mL三個(gè)濃度水平下,回收率為84％～102％。該方法靈敏度高,定量準(zhǔn)確,適用于海鮮調(diào)味品的質(zhì)量安全控制。
　　 使用熔融核填料色譜柱,整合固相基質(zhì)分散(MSPD)前處理方法

4、,建立了在線(xiàn)UPLC-MS/MS聯(lián)用方法?；前奉?lèi)藥物(Sulfonamides,Sas)是一類(lèi)傳統(tǒng)的人工合成抗菌藥物,我國(guó)《動(dòng)物性食品中獸藥的最高殘留量》中明確規(guī)定,磺胺在食用動(dòng)物的腎、肝、肌肉、脂肪中的最大殘留量不得超過(guò)100μ g/kg,奶制品中為100μ g/kg。該方法無(wú)需單獨(dú)前處理,只需將目標(biāo)樣品與MSPD填料研磨混勻,即可上樣。將該新型方法用于水產(chǎn)品中的13種磺胺同時(shí)定量檢測(cè)分析。質(zhì)譜采用ESI正源多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式。

5、根據(jù)歐盟2002/657/EC決議,對(duì)該方法進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果表明,該方法在濃度為0.1-100 ng/mL范圍內(nèi)線(xiàn)性關(guān)系良好(R2=0.993-0.998)。日內(nèi)/日間精密度相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差波動(dòng)范圍分別為1.8％-7.8％和2.8％-10.3％。所有目標(biāo)化合物回收率在69.0-96.3％之間,RSDs≤13.2％。新型在線(xiàn)MSPD-LIPLC-MS/MS方法適用于水產(chǎn)品中磺胺類(lèi)藥物的定量檢測(cè),該方法快速、靈敏,結(jié)果可靠。
　　 整合在

6、線(xiàn)聯(lián)用固相萃取(SPE)技術(shù)與超高效液相/串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù),建立了在線(xiàn)SPE-LC-MS/MS定量分析水產(chǎn)品中三芳基甲烷類(lèi)化學(xué)物質(zhì)的方法。2002年5月,我國(guó)將孔雀石綠列入了《食品動(dòng)物禁用的獸藥及其化合物清單》,明令禁止其用于所有可食用動(dòng)物。實(shí)驗(yàn)優(yōu)化了在線(xiàn)SPE-LC-MS/MS設(shè)備的各個(gè)參數(shù),使得目標(biāo)化合物回收率達(dá)到最高。同時(shí),引入了一種新型的潛力填料一多壁碳納米(MWCNTs)。MWCNTs吸附性良好,回收率高,其性能媲美于C18填料,

7、且其成本較低,價(jià)格低廉,是一種十分優(yōu)秀的常規(guī)填料替代品。在線(xiàn)SPE-LC-MS/MS方法極大地縮短了分析時(shí)間,且峰形良好,能夠使定量準(zhǔn)確。串聯(lián)質(zhì)譜的多離子反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM)模式,保證每種化合物色譜峰能夠獲得足夠的數(shù)據(jù)采集點(diǎn)數(shù),提高了靈敏度,降低了檢測(cè)限。采用空白基質(zhì)溶稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)各點(diǎn),有效地降低了基質(zhì)干擾,采用內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行定量,三苯甲烷類(lèi)化合物標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的相關(guān)系數(shù)良好。內(nèi)標(biāo)法的使用,有效的減小了多種試驗(yàn)誤差,方法的精密度和準(zhǔn)確度較外標(biāo)法更好

8、。經(jīng)方法學(xué)驗(yàn)證:孔雀石綠、無(wú)色孔雀石綠、結(jié)晶紫、無(wú)色結(jié)晶紫以及堿性艷綠的決定限度CCα為0.13～0.42μg/kg,檢測(cè)容量(CCβ)為0.17～0.54μg/kg。線(xiàn)性范圍均為0.5μg/L～100μg/L,R2分別為0.9990～0.9995,具有良好的線(xiàn)性關(guān)系。三苯甲烷類(lèi)化合物回收率都比較好,回收率在84.6～101.4％之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差在2.8％～10.2％之間。本方法可適用于水產(chǎn)品中三苯甲烷類(lèi)化合物的定性、定量檢測(cè)分析,具