慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛和脾胃濕熱證候差異的蛋白組學(xué)研究.pdf

1、目的：采用同位素標(biāo)記相對(duì)和絕對(duì)定量(isobaric tags for relative and absolute quantitation，iTRAQ)聯(lián)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(1iquidchromatography tandem mass spectrometer，LC-MS/MS)技術(shù)對(duì)慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證、脾胃濕熱證患者與健康志愿者的血清樣本進(jìn)行蛋白相對(duì)定量檢測(cè)以分析、鑒定兩證型之間的差異性表達(dá)蛋白并對(duì)其進(jìn)行生物學(xué)分析，以

2、便從分子生物學(xué)層面探討兩證的內(nèi)在聯(lián)系與區(qū)別、發(fā)現(xiàn)兩證之間可能的生物標(biāo)志物，為中醫(yī)證候本質(zhì)的現(xiàn)代化研究提供依據(jù)。
　　方法：選取四川大學(xué)華西醫(yī)院門診及住院部符合西醫(yī)、中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)及排除標(biāo)準(zhǔn)的慢性乙型病毒性肝炎肝郁脾虛證和脾胃濕熱證患者及來自成都市的健康志愿者作為研究對(duì)象。抽取患者及健康志愿者的血液，對(duì)血液進(jìn)行離心并制備血清后對(duì)樣品進(jìn)行同位素標(biāo)記相對(duì)和絕對(duì)定量(isobaric tags for relative and absolu

3、te quantitation，iTRAQ)聯(lián)合液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜(1iquidchromatography tandem mass spectrometer，LC-MS/MS)檢測(cè)，篩選證候間差異表達(dá)蛋白并對(duì)其進(jìn)行生物學(xué)分析。
　　結(jié)果：（1）肝郁脾虛組和脾胃濕熱組差異表達(dá)蛋白共61個(gè)，其中上調(diào)表達(dá)的16個(gè)，下調(diào)表達(dá)的45個(gè)。（2）肝郁脾虛組和脾胃濕熱組間差異性蛋白的GO顯著性分析共得到生物進(jìn)程條目35個(gè)，細(xì)胞成分條目16個(gè)，分子

4、功能條目26個(gè)。（3）證候間差異蛋白Pathway顯著性富集分析顯示兩證之間差異蛋白涉及脂肪酸代謝、視黃醇代謝、精脯氨酸代謝、丙-谷-天冬氨酸代謝、氧化磷酸化代謝與肝酶P-450相關(guān)的毒物和共棲代謝通路。（4）經(jīng)過String分析YWHAH、RhoC、RhoA、ATP5A1、ATP5B、CDH1蛋白處于差異蛋白功能網(wǎng)絡(luò)交叉點(diǎn)。
　　結(jié)論：1、發(fā)現(xiàn)了肝郁脾虛與脾胃濕熱證候間差異表達(dá)蛋白譜。2、處于差異蛋白蛋白功能網(wǎng)圖中交點(diǎn)位置的YW