氯霉素膠體金試紙條的研制.pdf

1、氯霉素是一種高效廣譜抗生素,常用于治療人體和動物的細菌性疾病,但是氯霉素殘留對人體有較強的副作用,所以對于動物源性食品中的氯霉素殘留的檢測顯得尤為重要。傳統(tǒng)氯霉素殘留分析不乏靈敏度高,準確性好的檢測方法,但很難滿足現(xiàn)場、快速的檢測需求。故建立快速、高效的檢測方法并制備出相應的產(chǎn)品是大勢所趨。
　　 本研究為了提高膠體金試紙條的靈敏度和穩(wěn)定性,對不同粒徑的膠體金試紙條工藝、樣品前處理方法進行了優(yōu)化,具體研究內(nèi)容如下:
　　

2、 (1)膠體金試紙條工藝優(yōu)化
　　 利用氯霉素膠體金免疫層析分析方法制備氯霉素膠體金試紙條,利用檸檬酸三鈉法分別制備20、30、40nm膠體金,并分別優(yōu)化三種膠體金試紙條的制備工藝條件。結(jié)果發(fā)現(xiàn),用同樣的方法標記三種膠體金標記氯霉素單克隆抗體效果沒有明顯差異,只是標記蛋白量略有不同；三種金標抗體純化離心速度分別為10000、8000、8000r／min,粒徑越小離心速度越大；三種粒徑的膠體金可以共用試紙條材料,只是在硝酸纖維膜上

3、抗原、羊抗鼠IgG最佳包被濃度略有不同。
　　 (2)試紙條性能測試
　　 20、30、40nm膠體金試紙條靈敏度依次為7、3、9ng／mL；與青霉素、慶大霉素、鏈霉素、四環(huán)素的交叉反應均大于200ng／mL；干燥保存2個月；30nm的膠體金制備的膠體金試紙條在穩(wěn)定性、靈敏度方面都明顯優(yōu)于20nm和40nm。
　　 (3)實際樣品檢測
　　 利用30nm膠體金生產(chǎn)氯霉素膠體金試紙條,并對實際樣品進行檢測,