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文檔簡介
1、目的:研制不同分子量聚富馬酸酯/氧化石墨烯水凝膠,明確其組成對大鼠骨髓間充質干細胞增殖及向成骨細胞分化的作用規(guī)律。
方法:低聚乙二醇富馬酸酯通過氧化還原基團引發(fā)系統(tǒng)產(chǎn)生交聯(lián),制備出4種分子量的低聚乙二醇富馬酸酯水凝膠,對水凝膠的成膠時間以及溶脹和降解性能進行檢測。將骨髓間充質干細胞種植到4種分子量的水凝膠中,實驗分為4組,均在成骨培養(yǎng)液中誘導1-3周,通過組織學染色(蘇木精-伊紅染色和茜素紅染色)和免疫熒光染色檢測水凝膠材料對
2、骨髓間充質干細胞形態(tài)的影響以及成骨分化的效果。通過物理共混方式將氧化石墨烯摻雜在低聚乙二醇富馬酸酯中,制備低聚乙二醇富馬酸酯/氧化石墨烯復合水凝膠,并對其理化性能進行評價。后將骨髓間充質干細胞包裹其中共培養(yǎng),成骨誘導3、7、14和21d后,經(jīng)蘇木精-伊紅染色、Von Kossa染色以及茜素紅染色和免疫熒光染色檢測復合水凝膠對骨髓間充質干細胞形態(tài)的影響以及成骨分化的效果。
結果:隨著水凝膠分子量的增加,成膠時間變短,凝膠的溶脹度
3、明顯增加,且隨著時間的推移,水凝膠分子量越大,降解速率越快,即水凝膠的降解速率與分子量成正比。毒性實驗結果表明低聚乙二醇富馬酸酯水凝膠具有良好的生物相容性。對不同分子量的水凝膠支架材料包裹細胞進行組織學與免疫熒光染色,得出結果,細胞經(jīng)誘導后,在具有適當溶脹與降解特性的分子量(3K和10K)水凝膠中所形成的礦化結節(jié)數(shù)量顯著多于在其它兩種分子量中的結節(jié)數(shù),說明有利于細胞的增殖與分化。通過對包裹有細胞的低聚乙二醇富馬酸酯/氧化石墨烯復合水凝膠
4、在不同時間點(3、7、14和21d)進行組織學染色及免疫熒光染色,發(fā)現(xiàn)細胞在復合水凝膠內良好地生長和增殖,隨著成骨誘導時間的延長,礦化結節(jié)以及成骨基因表達量逐漸升高,且相比于單純低聚乙二醇富馬酸酯水凝膠,低聚乙二醇富馬酸酯/氧化石墨烯復合水凝膠組更能促進骨髓問充質干細胞向成骨細胞分化。
結論:低聚乙二醇富馬酸酯水凝膠對骨髓間充質干細胞具有良好的生物相容性,且3K與10K的水凝膠對細胞的成骨分化有一定的良性調節(jié)作用;低聚乙二醇富
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