大鼠肝衰竭前期模型建立及輔助性T淋巴細(xì)胞17-調(diào)節(jié)性T淋巴細(xì)胞失衡的研究.pdf

1、第一部分、大鼠肝衰竭前期模型的建立及鑒定
　　目的：研究大鼠肝衰竭前期模型建立的方法，為臨床研究提供模型基礎(chǔ)。
　　方法：44只大鼠，分為2組，將第一組大鼠20只分為4小組，用4種不同劑量的1％四氯化碳（CCl4）進(jìn)行腹腔注射，將第二組24只大鼠分為5小組，以5種不同劑量的內(nèi)毒素（LPS）聯(lián)合D-氨基半乳糖（D-GalN）進(jìn)行腹腔注射。觀察記錄大鼠活動(dòng)變化，肝臟大體改變，肝組織病理學(xué)改變及血清生化學(xué)改變，通過(guò)這些指標(biāo)評(píng)價(jià)造模

2、效果。
　　結(jié)果：第一組大鼠中，1%四氯化碳低于50mg/kg劑量，肝細(xì)胞出現(xiàn)腫脹，肝組織小片壞死；超過(guò)500mg/kg劑量，肝組織出現(xiàn)大塊壞死。1%四氯化碳造模時(shí)，50mg/kg是肝衰竭前期適合劑量。第二組大鼠中，低于D-GalN700mg/kg聯(lián)合LPS35ug/kg劑量，肝細(xì)胞腫脹，肝組織出現(xiàn)小片壞死，超過(guò)D-GalN3500mg/kg聯(lián)合LPS175ug/kg劑量，肝組織出現(xiàn)大塊壞死，D-GalN聯(lián)合LPS造模時(shí)，D-Ga

3、lN350mg/kg聯(lián)合LPS17.5ug/kg是肝衰竭前期適合劑量。
　　結(jié)論：1%四氯化碳50mg/kg和D-GalN350mg/kg聯(lián)合LPS17.5ug/kg兩種方法均可成功建立肝衰竭前期大鼠模型，肝臟大體改變、肝組織學(xué)及血清生化學(xué)變化也符合肝衰竭前期改變。
　　第二部分、肝衰竭前期大鼠糖皮質(zhì)激素及胸腺肽干預(yù)后Th17,Treg,及Th17/Treg變化
　　目的：研究1%四氯化碳50mg/kg和D-GalN3

4、50mg/kg聯(lián)合LPS17.5ug/kg兩種方法造模后大鼠血清Th17,Treg,Th17/Treg的變化及地塞米松和胸腺肽干預(yù)對(duì)Th17，Treg，Th17/Treg的影響。
　　方法：用1%四氯化碳和D-GalN聯(lián)合LPS兩種方法以適當(dāng)劑量造模，造模后大鼠尾靜脈取血置肝素鈉抗凝管中，流式細(xì)胞術(shù)、細(xì)胞刺激破膜技術(shù)測(cè)定細(xì)胞因子，Th17，Treg，計(jì)算Th17/Treg，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)

5、。大鼠處死后取新鮮肝組織行HE染色及免疫組化染色。
　　結(jié)果：兩種方法造模后，大鼠全血Th17上升，Treg下降，Th17/Treg失衡，肝組織病理符合肝衰竭前期改變。地塞米松干預(yù)后Th17/Treg失衡改善，胸腺肽干預(yù)后動(dòng)物模型Th17上升，Treg輕微下降，Th17/Treg失衡加劇。
　　結(jié)論：兩種方法造模均可改變大鼠免疫系統(tǒng)T細(xì)胞比例，Th17/Treg失衡，肝組織病理符合肝衰竭前期改變。地塞米松可改善Th17/Tr