大豆低溫脫溶粕中異黃酮、皂甙和低聚糖的提取與分離.pdf

1、大豆異黃酮、皂甙和低聚糖是大豆中的三種主要活性成分，是近年來食品與營(yíng)養(yǎng)學(xué)研究的熱點(diǎn)之一。大豆異黃酮具有降膽固醇、抗防骨質(zhì)疏松、緩解更年期綜合癥等有益的生理作用。大豆皂甙具有降血脂、降膽固醇、抗氧化、抗癌、增加免疫力等作用，可廣泛應(yīng)用于藥品、保健食品中。大豆低聚糖具有整腸效應(yīng)、防止腹瀉、生成營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)、抑制腸內(nèi)腐敗產(chǎn)物生成和保護(hù)肝臟等作用。 1.用低溫脫溶大豆粕為原料，對(duì)乙醇濃度、提取時(shí)間、溫度、液料比和提取次數(shù)進(jìn)行了單因素試驗(yàn)，通

2、過響應(yīng)面實(shí)驗(yàn)及回歸分析得出用含水乙醇提取三種活性物質(zhì)的工藝參數(shù)為：溫度(51.7±1)℃、乙醇濃度59.7﹪、每次提取液料比為10：1、每次提取時(shí)間1.9h、提取2次。該條件下提取的異黃酮提取率為95.0﹪、皂甙提取率為98.1﹪，總糖提取率為98.0﹪。同時(shí)將濾餅進(jìn)行再次浸出制得的濃縮蛋白產(chǎn)品蛋白含量65.11﹪。 2.對(duì)三種活性物質(zhì)的分離工藝進(jìn)行研究。得到除蛋白最佳條件：4℃下冷藏72h，pH值4.1時(shí)蛋白去除率達(dá)86.3﹪

3、。低聚糖的活性炭脫色最佳條件為：活性炭用量1.93﹪、脫色溫度(61.7±1)℃、吸附時(shí)間44min、pH值為3.58，脫色率為30.25﹪。低聚糖的離子交換脫鹽的較優(yōu)條件為：溫度50-60℃、流速35L糖液/L樹脂·h。得到的三種產(chǎn)品成分：異黃酮產(chǎn)品含量35.40﹪，皂甙產(chǎn)品含量40.68﹪，低聚糖產(chǎn)品總糖含量68.94﹪。 3.以大孔樹脂柱色譜、制備薄層色譜和結(jié)晶的方法從大豆粕的乙醇提取物中分離出2種異黃酮單體，以HPLC，

4、UV，IR，ESI/MS，和1HNMR,13CNMR,DEPTNMR,HQSCNMR分析確證其結(jié)構(gòu)是daidzin和genistein。 4.進(jìn)行了大豆皂甙的紫外分光光度測(cè)定試驗(yàn)。脫脂豆粕以HPD-600純化后得到總皂甙，在209nm處測(cè)定總皂甙含量。以齊墩果酸為標(biāo)準(zhǔn)物建立的回歸曲線高度顯著，線性和穩(wěn)定性可靠。樣品重復(fù)測(cè)定的變異系數(shù)Cv=0.52﹪，平均加標(biāo)回收率100.4﹪。測(cè)定結(jié)果表明脫脂大豆粕子葉中的皂甙含量分別為1.16