小鼠皮膚切創(chuàng)愈合過程中磷酸化JNK表達及其與損傷時間相關性的研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩39頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權,請進行舉報或認領

文檔簡介

1、目的:皮膚損傷愈合是一個復雜的過程,包括血液成分凝集、炎癥、肉芽組織形成、新生上皮覆蓋、結締組織收縮和纖維化等過程。c—Jun氨基末端激酶(c—Jun N-Terminal kinase/stress—activated protein kinase,JNK/SAPK)為絲裂酶原活化蛋白激酶(mitogen—activated protein kinase,MAPK)家族的一個重要的亞族,可通過細胞性壓力和炎癥刺激發(fā)生磷酸化而激活,與重

2、要的細胞反應有關,比如炎性反應和凋亡。本研究應用免疫組織化學和Western blot技術,檢測小鼠皮膚損傷區(qū)切創(chuàng)后各時間段磷酸化JNK(phospho—JNK,p—JNK)的變化情況,探討p—JNK在皮膚損傷愈合中的作用及其在損傷時間推斷上應用的可能性。 方法:健康成年(8周齡)清潔級昆明系小鼠55只,雌雄不限,體質(zhì)量35~40g,隨機分為11組。其中皮膚切創(chuàng)分為10個時間段組,另一組為正常對照組,每組均為5只小鼠。乙醚氣體吸

3、入麻醉,背部剪毛處理后,常規(guī)手術消毒,在背部中央做一縱行長1.5cm皮膚全層切口,深達筋膜。分別于傷后0h、3h、6h、12h、1d、3d、Sd、7d、10d和14d將小鼠脫頸椎處死,取傷口處1.5cm×1.0cm皮膚組織。正常對照組小鼠麻醉后背部剪毛,不做切創(chuàng),觀察至14d,脫頸椎處死,取相同部位同等大小皮膚,以備HE染色、免疫組織化學染色和Western blot檢測應用。應用免疫組織化學和Western blot技術檢測55例小鼠

4、皮膚切創(chuàng)后各時間段p—JNK變化情況,以非切創(chuàng)小鼠皮膚組織作對照,顯微鏡×400倍下,在損傷區(qū)及損傷周邊區(qū)隨機選取10個視野,計數(shù)細胞總數(shù)、陽性細胞數(shù)及陽性細胞率。應用Fluochem V2.0軟件檢測各時間段的平均灰度值,測得數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差(x±s)表示。用SPSS13.0 for Windows進行單因素方差分析,以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結果:正常對照組小鼠皮膚的表皮、毛囊及皮脂腺中表達p—JNK。皮膚切創(chuàng)傷

5、后6h,可見少數(shù)多核粒細胞有p—JNK表達。傷后12~24h,大量浸潤的多核粒細胞和部分單個核細胞p—JNK呈陽性。傷后1~3d隨著時間的延長,p—JNK陽性細胞主要以單個核細胞為主。傷后5~14d p—JNK表達主要在成纖維細胞中。傷后0~3h,p—JNK陽性細胞率較低,隨著傷后時間的延長,p—JNK陽性細胞率逐漸增加,1d達到高峰。傷后3~5d一直呈高表達狀態(tài)。傷后7d p—JNK陽性細胞率達到第二峰,隨后逐漸下降。除傷后3d與5d

6、陽性細胞率無統(tǒng)計學差異外(P>0.05),其他各組與相鄰上組的細胞總數(shù)及陽性細胞率差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。Western blot結果顯示正常對照皮膚內(nèi)有p—JNK陽性條帶。皮膚切創(chuàng)傷后各時間段組p—JNK表達強度有一定規(guī)律。傷后0~12h,陽性條帶逐漸增強;1d,稍有下降;3d,p—JNK達到高峰。傷后5d、10d,較少;但傷后7d p—JNK相對較深。到傷后14d p—JNK陽性條帶基本與正常對照組條帶情況一致。除0h與

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責。
  • 6. 下載文件中如有侵權或不適當內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論